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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】我PCR出的条带非常细，麻烦问一下这是怎么回事
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guanjinke

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】我PCR出的条带非常细，麻烦问一下这是怎么回事

各位大侠：我PCR出的条带非常细，麻烦问一下这是怎么回事？是不是引物有问题啊？引物是以前设计的，和现在扩增的模板是同一个目但是是不同的两个科。

[ Last edited by 1949stone on 2011-3-18 at 10:29 ]
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1楼 2011-03-17 23:38:13
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wqj1988926

金虫 (正式写手)
★
guanjinke(金币+1): 2011-03-18 13:55:52
lstt09nk(金币+1): 感谢交流~ 2011-03-18 15:31:00
guanjinke(金币+2): 2011-04-25 21:07:30
以第一次的产物为模板再扩一次，条带的亮度会增加的
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5楼2011-03-18 12:37:46
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zhengfan1109

银虫 (正式写手)
★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-03-18 10:28:42
guanjinke(金币+1): 2011-03-18 13:55:39
guanjinke(金币+3): 2011-04-25 21:07:08
引用回帖:
Originally posted by guanjinke at 2011-03-17 23:38:13:
各位大侠：我PCR出的条带非常细，麻烦问一下这是怎么回事？是不是引物有问题啊？引物是以前设计的，和现在扩增的模板是同一个目但是是不同的两个科。

非常细，有杂带吗？原因可能性很多：
1）引物量不够。
2）特异性不够强，两个科基因也许有差别。
3）PCR条件不是最佳的。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-03-18 08:40:31
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guanjinke

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhengfan1109 at 2011-03-18 08:40:31:
非常细，有杂带吗？原因可能性很多：
1）引物量不够。
2）特异性不够强，两个科基因也许有差别。
3）PCR条件不是最佳的。

谢谢指教！
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3楼2011-03-18 12:08:22
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)
★
guanjinke(金币+1): 2011-03-18 13:55:58
lstt09nk(金币+1): 是的 2011-03-18 15:30:34
guanjinke(金币+2): 2011-04-25 21:06:56
其实只要出现目的条带就可以说明PCR成功了，如果是克隆基因或测序的话可以连接到载体上
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4楼2011-03-18 12:35:50
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