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【求助/交流】做western一抗不好用怎么办?
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kebo050551
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[交流]
【求助/交流】做western一抗不好用怎么办?
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实验室以前自己做的抗体,不太好用,出现很多杂带,背景高(二抗也不太好用),目的条带经常出 不来,分子量20kd左右。大家有什么办法能去除背景,又能把目的条带压出来的好办法吗?
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2011-03-15 12:12:48
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):给个红包,谢谢回帖交流
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Originally posted by
kebo050551
at 2011-03-15 12:12:48:
实验室以前自己做的抗体,不太好用,出现很多杂带,背景高(二抗也不太好用),目的条带经常出 不来,分子量20kd左右。大家有什么办法能去除背景,又能把目的条带压出来的好办法吗?
那人家以前做的人检查的效果好么?是不是人家也有做出这么杂带呢?是否抗体未经纯化呢?
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2011-03-15 12:29:12
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wudiguigui99
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amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-15 19:37:07
自己做的一抗很可能效果不好的
可以先纯化下抗体
然后洗膜的时候用0.3TBST
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2011-03-15 13:50:45
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Originally posted by
dianaofyezi
at 2011-03-15 12:29:12:
那人家以前做的人检查的效果好么?是不是人家也有做出这么杂带呢?是否抗体未经纯化呢?
抗体量不是很多,所以也 不好做纯化,抗体好像是没做过纯化,是以前师兄做的,抗体呈红色。
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2011-03-17 12:23:12
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Originally posted by
dianaofyezi
at 2011-03-15 12:29:12:
那人家以前做的人检查的效果好么?是不是人家也有做出这么杂带呢?是否抗体未经纯化呢?
抗体量不是很多,所以也 不好做纯化,抗体好像是没做过纯化,是以前师兄做的,抗体呈红色。
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2011-03-17 12:23:32
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Originally posted by
wudiguigui99
at 2011-03-15 13:50:45:
自己做的一抗很可能效果不好的
可以先纯化下抗体
然后洗膜的时候用0.3TBST
以前师兄做有条带,但是我怀疑分子量不对,我曾经做出来过,就一条带,但是分子量不对。
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2011-03-17 12:24:44
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你师兄真牛 还自己做抗体
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::::::::::::::::jusmine:::::::::::::::
7楼
2011-03-29 15:56:31
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