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kebo050551

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】做western一抗不好用怎么办? 已有4人参与

实验室以前自己做的抗体,不太好用,出现很多杂带,背景高(二抗也不太好用),目的条带经常出 不来,分子量20kd左右。大家有什么办法能去除背景,又能把目的条带压出来的好办法吗?
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by kebo050551 at 2011-03-15 12:12:48:
实验室以前自己做的抗体,不太好用,出现很多杂带,背景高(二抗也不太好用),目的条带经常出 不来,分子量20kd左右。大家有什么办法能去除背景,又能把目的条带压出来的好办法吗?

那人家以前做的人检查的效果好么?是不是人家也有做出这么杂带呢?是否抗体未经纯化呢?
52187644
2楼2011-03-15 12:29:12
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wudiguigui99

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-15 19:37:07
自己做的一抗很可能效果不好的
可以先纯化下抗体
然后洗膜的时候用0.3TBST
3楼2011-03-15 13:50:45
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kebo050551

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2011-03-15 12:29:12:
那人家以前做的人检查的效果好么?是不是人家也有做出这么杂带呢?是否抗体未经纯化呢?

抗体量不是很多,所以也 不好做纯化,抗体好像是没做过纯化,是以前师兄做的,抗体呈红色。
4楼2011-03-17 12:23:12
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kebo050551

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2011-03-15 12:29:12:
那人家以前做的人检查的效果好么?是不是人家也有做出这么杂带呢?是否抗体未经纯化呢?

抗体量不是很多,所以也 不好做纯化,抗体好像是没做过纯化,是以前师兄做的,抗体呈红色。
5楼2011-03-17 12:23:32
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kebo050551

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by wudiguigui99 at 2011-03-15 13:50:45:
自己做的一抗很可能效果不好的
可以先纯化下抗体
然后洗膜的时候用0.3TBST

以前师兄做有条带,但是我怀疑分子量不对,我曾经做出来过,就一条带,但是分子量不对。
6楼2011-03-17 12:24:44
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lavender169

木虫 (正式写手)


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你师兄真牛 还自己做抗体
::::::::::::::::jusmine:::::::::::::::
7楼2011-03-29 15:56:31
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