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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】GST蛋白纯化
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jhw1119

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】GST蛋白纯化已有3人参与

请教：我体外表达GST重组蛋白，蛋白溶解性很好，但是洗脱下来发现目的条带很弱，有一条非常亮的非特异带，洗脱下来的基本全是这条带，不知是什么原因。载体构建测序都没问题。大家有无遇到同样的问题，请教指点。谢谢！急急急急！！
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1楼2011-03-12 21:00:41
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tigertang

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-03-12 21:40:13
蛋白溶解性很好？---大部分在上清？
有一条非常亮的非特异带？--如果小于目标带，可能是降解带，优化防止降解；如果大于目标带，提高binding时去污剂的浓度，提高特异性.
建议上图，大家好帮你分析！
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2楼2011-03-12 21:32:30
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labrat

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1. please check binding and washing procedure.
2. please check operating condition, may cause by external factor.
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3楼2011-03-13 10:18:15
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yinchu1990

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
加 PMSF  等蛋白酶抑制剂 防止降解
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4楼2013-05-12 09:34:38
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