应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】普通Taq酶突变率的问题
61/1返回列表
查看: 3434  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

夏尔list

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】普通Taq酶突变率的问题

1314bp的基因，我用普通Taq酶扩基因扩出来了条带，可是高保真的条带很淡。
我们实验室一般是先用普通taq酶扩，扩出来了，再换高保真酶，说是普通taq酶错配率较高。
可是我普通Taq酶扩出来好几次，但是高保真酶扩的条带都很淡。我想直接用普通Taq酶扩出来的条带回收去测序可以么？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-12 13:18:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

路人甲007

木虫 (正式写手)
夏尔list(金币+1): 也只能这样了 2011-03-12 14:19:42
可以试试的啊  楼主  如果测序正确  就可以了
赞一下 回复此楼
2楼2011-03-12 13:37:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
★ ★
夏尔list(金币+1): 谢谢 2011-03-12 15:11:53
lstt09nk(金币+2): 有了更高级一点的试剂的时候普通试剂就显得有点矫情了~~呵呵,实际照样用~ 2011-03-12 15:32:15
高保真酶你是用什么做模板呢？PCR产物做模板还是质粒呀还是CDNA啊？如果是质粒和PCR产物的话，可以降低退火温度看会不会好点。
普通的TAQ酶，其实也没别人说的那么严重，当年没高保真酶的时候做克隆有普通酶就不错了，还不照样用呀。呵呵  突变率不是那么高的。
我们实验室之前做克隆都是用普通酶的，只是最近才买了高保真酶。普通酶一样做。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-03-12 14:25:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏尔list

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 阿修罗Axuro at 2011-03-12 14:25:38:
高保真酶你是用什么做模板呢？PCR产物做模板还是质粒呀还是CDNA啊？如果是质粒和PCR产物的话，可以降低退火温度看会不会好点。
普通的TAQ酶，其实也没别人说的那么严重，当年没高保真酶的时候做克隆有普通酶就不 ...

模板是cDNA，嗯，谢谢了~我先拿去测序吧，看结果了
赞一下 回复此楼
4楼2011-03-12 15:12:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)
普通Taq酶千分之一的错配率好像，问题不大。
现在高保真高活性的酶不是也有嘛。
赞一下 回复此楼
5楼2011-03-14 10:41:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangxn2010

木虫 (著名写手)
夏尔list(金币+1): 期待RP爆发 2011-03-14 16:53:52
实际上1000个bp的片段Taq酶基本无错配，除非是运气不好
赞一下 回复此楼
6楼2011-03-14 11:32:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 夏尔list 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭