应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】普通Taq酶突变率的问题
51/1返回列表
查看: 3550  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

夏尔list

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】普通Taq酶突变率的问题

1314bp的基因，我用普通Taq酶扩基因扩出来了条带，可是高保真的条带很淡。
我们实验室一般是先用普通taq酶扩，扩出来了，再换高保真酶，说是普通taq酶错配率较高。
可是我普通Taq酶扩出来好几次，但是高保真酶扩的条带都很淡。我想直接用普通Taq酶扩出来的条带回收去测序可以么？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-12 13:18:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangxn2010

木虫 (著名写手)
夏尔list(金币+1): 期待RP爆发 2011-03-14 16:53:52
实际上1000个bp的片段Taq酶基本无错配，除非是运气不好
赞一下 回复此楼
6楼2011-03-14 11:32:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

路人甲007

木虫 (正式写手)
夏尔list(金币+1): 也只能这样了 2011-03-12 14:19:42
可以试试的啊  楼主  如果测序正确  就可以了
赞一下 回复此楼
2楼2011-03-12 13:37:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
★ ★
夏尔list(金币+1): 谢谢 2011-03-12 15:11:53
lstt09nk(金币+2): 有了更高级一点的试剂的时候普通试剂就显得有点矫情了~~呵呵,实际照样用~ 2011-03-12 15:32:15
高保真酶你是用什么做模板呢？PCR产物做模板还是质粒呀还是CDNA啊？如果是质粒和PCR产物的话，可以降低退火温度看会不会好点。
普通的TAQ酶，其实也没别人说的那么严重，当年没高保真酶的时候做克隆有普通酶就不错了，还不照样用呀。呵呵  突变率不是那么高的。
我们实验室之前做克隆都是用普通酶的，只是最近才买了高保真酶。普通酶一样做。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-03-12 14:25:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏尔list

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 阿修罗Axuro at 2011-03-12 14:25:38:
高保真酶你是用什么做模板呢？PCR产物做模板还是质粒呀还是CDNA啊？如果是质粒和PCR产物的话，可以降低退火温度看会不会好点。
普通的TAQ酶，其实也没别人说的那么严重，当年没高保真酶的时候做克隆有普通酶就不 ...

模板是cDNA，嗯，谢谢了~我先拿去测序吧，看结果了
赞一下 回复此楼
4楼2011-03-12 15:12:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 9/450 2026-08-21 15:38 by dcqxinyang
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 科研孤儿太难了 +15 我4大白菜 2026-08-20 16/800 2026-08-21 11:07 by yming1319
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭