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vs570588

木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】测序结果没有道理

我用PMD19-T载体,做克隆,现在序列结果出来,但是现在要么就是仅有载体结合目的基因处序列,要么就是既没有引物序列也没有载体结合目的基因处的序列。20个样品,都是这种结果。送到南京某家测序公司,前段时间我们这也有人送过去,还是这结果。急死我了,大家看这是啥原因,我用通用引物,做了菌落PCR,效果很好,固体培养基中加的是氨苄青霉素,也都长出来了。大家说说看呀?如果真没有办法,是不要重新做克隆?
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vs570588

木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-03-10 21:16:10:
片段很长么?

不是很长,目的基因片段大约200bp
3楼2011-03-10 21:37:59
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查看全部 11 个回答
引用回帖:
Originally posted by vs570588 at 2011-03-10 21:37:59:
不是很长,目的基因片段大约200bp

换公司测序。。。比如英骏、生工、华大等去测。先别急着再做克隆。
4楼2011-03-10 21:43:07
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phoenix211

金虫 (小有名气)


可以换家测下看。我们实验室一般找华大,结果都还不错。
5楼2011-03-11 01:36:00
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vs570588

木虫 (正式写手)


大家说说可能是我哪一步试验出差错了
6楼2011-03-11 08:38:29
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