[交流] 【求助/交流】线性化质粒能在大肠杆菌中表达吗

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1楼2011-03-08 08:22:12

roomofxw

木虫 (正式写手)

★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与

耳闻做定点突变的话，线性化的载体，直接转到菌中后，自己修复成质粒。

赞一下(2人)

2楼2011-03-08 08:28:44

susizheng

木虫 (著名写手)

★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与

刚做完定点突变，用的是全式金的盒子，并不是转的片段，转的是环状DNA。
貌似大肠不行，酵母是可以的。
如果认为大肠行的，希望给个文献，学习下。

3楼2011-03-08 09:00:42

tangbohejin

木虫之王 (文学泰斗)

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xnbioinfor(金币+1):谢谢参与

引用回帖:

Originally posted by roomofxw at 2011-03-08 08:28:44:
耳闻做定点突变的话，线性化的载体，直接转到菌中后，自己修复成质粒。

支持----

4楼2011-03-08 09:04:46

lingshao405

金虫 (著名写手)

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xnbioinfor(金币+1):谢谢参与

可以自己修复成环状的，大肠杆菌中应该也可以

5楼2011-03-08 09:38:50

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与

线性化的质粒在E.coli中很容易被降解的。

6楼2011-03-08 10:03:28

roomofxw

木虫 (正式写手)

★ ★
看天(金币+2): 鼓励交流 2011-03-08 11:43:53

引用回帖:

Originally posted by susizheng at 2011-03-08 09:00:42:
刚做完定点突变，用的是全式金的盒子，并不是转的片段，转的是环状DNA。
貌似大肠不行，酵母是可以的。
如果认为大肠行的，希望给个文献，学习下。

我没有留意过相关文献
但是公司做突变的同事，都是这么搞的，应该问题不大。

7楼2011-03-08 10:03:30

gudujianhen

新虫 (初入文坛)

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xnbioinfor(金币+1): 谢谢参与

T载体是线性化的，空的T载体转到感受态中，大肠杆菌还能生长吗？T载体有Amp，培养基中加入了Amp作为筛选。

8楼2016-03-09 15:33:47