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xnbioinfor

铜虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】线性化质粒能在大肠杆菌中表达吗

线性化质粒能在大肠杆菌中表达吗?
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xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
耳闻做定点突变的话,线性化的载体,直接转到菌中后,自己修复成质粒。
2楼2011-03-08 08:28:44
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xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
刚做完定点突变,用的是全式金的盒子,并不是转的片段,转的是环状DNA。
貌似大肠不行,酵母是可以的。
如果认为大肠行的,希望给个文献,学习下。
3楼2011-03-08 09:00:42
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tangbohejin

木虫之王 (文学泰斗)



xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by roomofxw at 2011-03-08 08:28:44:
耳闻做定点突变的话,线性化的载体,直接转到菌中后,自己修复成质粒。

支持----
4楼2011-03-08 09:04:46
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lingshao405

金虫 (著名写手)



xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
可以自己修复成环状的,大肠杆菌中应该也可以
5楼2011-03-08 09:38:50
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xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
线性化的质粒在E.coli中很容易被降解的。
6楼2011-03-08 10:03:28
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★ ★
看天(金币+2): 鼓励交流 2011-03-08 11:43:53
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-03-08 09:00:42:
刚做完定点突变,用的是全式金的盒子,并不是转的片段,转的是环状DNA。
貌似大肠不行,酵母是可以的。
如果认为大肠行的,希望给个文献,学习下。

我没有留意过相关文献
但是公司做突变的同事,都是这么搞的,应该问题不大。
7楼2011-03-08 10:03:30
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gudujianhen

新虫 (初入文坛)



xnbioinfor(金币+1): 谢谢参与
T载体是线性化的,空的T载体转到感受态中,大肠杆菌还能生长吗?T载体有Amp,培养基中加入了Amp作为筛选。
8楼2016-03-09 15:33:47
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