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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】如何对PCR测序产物进行分析？
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350784478

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】如何对PCR测序产物进行分析？ 已有8人参与

最近在做某一基因的RT-PCR反应，取得了进展。产物送去测序，已将测序结果发给我了，但是我不知道如何从测序峰图中看出是否有突变?
我晓得最简单的办法就是对碱基序列进行对照，但是由于碱基数较多，，所以操作起来比较麻烦，不知道是否有较简单的方法？
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朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。
1楼 2011-01-29 14:44:45
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pop_hjx_41

铜虫 (初入文坛)
★
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不知道你是在哪里测得还是自己测得 我送到华大测序 感觉如果是900左右的话 单向测序可能后面的就很不准了 如果不结合的话 是不是p出的是非特异性结合呢？
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8楼2011-02-03 22:37:05
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): good 2011-01-30 18:59:24
用软件进行比对啊
经典的bioedit到什么dnaman之类的都可以
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2楼2011-01-29 17:58:17
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phoenix211

金虫 (小有名气)
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dhd997(金币+2): 谢谢交流 2011-01-30 19:00:33
用软件做就好了啊，我一般用DNAMAN和Clustal Raindy。非常方便。
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3楼2011-01-29 23:41:22
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guoxingjun2008

金虫 (正式写手)
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dhd997(金币+3): good 2011-01-30 19:00:57
对头，但是不知道你是不是双向测序，如果是双向测序的话要用拼接软件拼接后再比对。
   另外我提醒一下你，不知道你PCR的时候用的普通Taq酶还是高保真Taq酶，如果是普通Taq酶的话，看突变是不科学的，因为普通Taq酶保真性不好，有渗入错误碱基的可能，所以最好是用Pfu！
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4楼2011-01-30 14:49:01
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