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syx1983

金虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】抗病基因克隆或定位

有一个小麦品种和其近等系，近等系有抗叶锈病的性状，如何克隆或定位这个抗病基因？请详细介绍方法及原理

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1楼2011-01-18 22:05:58

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翱宇

禁虫 (正式写手)

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有近亲植物，那就找到近亲植物的该同源基因的序列，假如你做小麦，则这个基因肯定没有序列吧。以近亲植物的同源基因设计引物，提取小麦的RNA，以OlogodT去扩增看能扩出来不，注意退火温度要很低。

假如运气好，扩增出来了，测序验证读码框和翻译的蛋白质。可以做亚克隆连入至GFP，在洋葱表皮等做细胞定位。