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【求助/交流】求助平板抑菌试验的技术问题
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如题,最近在做一个抑菌试验,需要验证一种固体片状材料的抗菌性能,由于不是粉末或者可溶物质,采用什么试验手段成为我的一个小难题。通过文献查阅,确定的试验方案是: 因为是预实验,所以采用的固体材料都是不抗菌的,想要先试试方案是否可行 方案1,将固体材料放置于平板的固体培养基上,滴菌液(大肠杆菌),涂开,之后再分别滴0.5%琼脂的半固体培养基,0.25%琼脂的半固体培养基及液体培养基; 方案2,预先制备厚度约3mm的琼脂培养基。将固体材料消毒之后平放在培养皿内,滴菌液,涂开,之后从预先制备的琼脂培养基薄层切开适当大小,盖在菌液上;(之所以这样是因为如果是固体培养基滴在菌液上,培养基太粘稠,而且极易凝固) 以上两种方案之后,将培养皿(盖子在上面,非倒放)37度培养12-16小时。 结果第二天一看,按照方案一培养的,材料上看不到明显的菌斑,而材料周围的固体培养基上却有大量菌斑。仔细想来,应该是因为盖子在上,水分冷凝后可能滴到了材料上,冲散了滴液体培养基的菌液。但材料上半固体培养基里面为什么不长细菌呢,是时间不够长吗? 方案二,预先做好的琼脂培养基薄层,做了不同菌液浓度的,发现小浓度的有依稀的菌落生成,但是大浓度(10~5和10~7)却没有菌落和菌斑,实在是搞不懂。 啰嗦这么多,想要请有经验的虫子们教教我,我这抑菌试验到底该怎么做啊~~~~头大。。。。 (文献上讲,滴琼脂培养基时候,要点是温度,不能太高,否则细菌会烫死,也不能太低,要不就凝固了,这些我也都考虑到了,实在是。。。。不知道该怎么办) |
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