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chunmeiyang

银虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】蛋白纯化中透析的问题！！已有5人参与

我在纯化蛋白透析时，如果我在透析buffer中加入一定浓度的盐，蛋白反而会沉淀，若不加盐，蛋白便不会沉，这是为什么啊？

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1楼 2011-01-10 09:41:35

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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

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引用回帖:

Originally posted by liulanhua at 2011-04-26 08:24:35:
怎么判断稳定性范围呢？那我的蛋白的等电点是4左右，是不是蛋白的额稳定范围就是PH=3~5啊？
过His纯化柱是用PH=8的含有咪唑的缓冲液洗脱蛋白的，那我要透析的话需要调一个PH梯度吗？还是直接用PH=3~5的缓冲液 ...

稳定pH不是说就等电点附近一点点范围的，你纯化的时候都选择了pH8缓冲液，如果没有目的蛋白沉淀或者变性，说明你的蛋白在pH8是稳定的，那就用pH8溶液透析好了。