24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1636  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

congyunxy

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】长片段PCR 已有7人参与

现在正在扩增一个长约2800左右的基因,大家有什么好的建议吗?我是要构建这个基因的真核表达载体,所以不能有突变的位点。

[ Last edited by congyunxy on 2011-1-10 at 13:21 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HO-1

木虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
最爱花诗雨(金币+1):欢迎热心的虫虫 2011-01-08 15:55:16
用TAKARA的LA Taq酶,我觉得挺好用的!
3楼2011-01-08 14:59:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2011-01-08 12:18:31
2.8 kb不长哦,probest就能扩出来。
Thank-you,so-blue.
2楼2011-01-08 12:16:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zx1984

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
就是延伸的时候,时间要长一些
4楼2011-01-08 15:16:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

congyunxy

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by HO-1 at 2011-01-08 14:59:30:
用TAKARA的LA Taq酶,我觉得挺好用的!

现在我就用的这个酶,但是非特异性扩增很多。用primer5设计引物,满足条件的引物不多,于是在引物中修改了几个碱基为了使上下游引物Tm值相近(引物是在起始密码子之前和终止密码子之后设计的)。能扩出目的片段,由于杂带多,于是以扩出来目的带的那一管PCR产物为模板,但是非特异性的带出来了,特异性的带没了。
5楼2011-01-08 15:49:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +10 drizzle_9 2026-04-12 11/550 2026-04-12 20:24 by bljnqdcc
[考研] 0854调剂 +5 长弓傲 2026-04-12 7/350 2026-04-12 19:35 by yukihao
[考研] 322求调剂 +6 123安康 2026-04-12 13/650 2026-04-12 15:51 by 123安康
[考研] 求调剂 +18 MAX怅惘 2026-04-09 20/1000 2026-04-11 23:31 by zhen~
[考研] 291分调剂 +5 上岸小莹加油 2026-04-09 6/300 2026-04-11 21:06 by 逆水乘风
[考研] 296求调剂 +14 汪!?! 2026-04-08 15/750 2026-04-11 20:28 by dongdian1
[考研] 农业管理302分求调剂 +3 xuening1 2026-04-10 3/150 2026-04-11 10:18 by zhq0425
[考研] 0854调剂 +4 长弓傲 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:18 by 猪会飞
[考研] 368求调剂 +3 17385968172 2026-04-10 3/150 2026-04-10 20:12 by 电子奥德彪
[考研] 一志愿华东师范生物学326分,求调剂 +8 刘墨墨 2026-04-09 8/400 2026-04-10 12:00 by pengliang8036
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +22 土豆er? 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 10:58 by 高维春
[考博] 博士自荐 +7 可可小胖 2026-04-08 7/350 2026-04-10 08:28 by kimhero
[考研] 生物学求调剂 一志愿沪9,326分 +7 刘墨墨 2026-04-06 7/350 2026-04-10 08:11 by kangsm
[考研] 085404,285分求调剂 +12 薇薇考研 2026-04-07 14/700 2026-04-09 23:10 by parmtree
[考研] 材料化工总分334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 20:19 by maddjdld
[考研] 一志愿中国科学院上海有机所,有机化学356分找调剂 +11 Nadiums 2026-04-09 11/550 2026-04-09 18:04 by lijunpoly
[考研] 材料科学与工程320求调剂,080500 +12 黄瓜味薯片 2026-04-06 12/600 2026-04-08 16:26 by luoyongfeng
[考研] 一志愿南京航空航天大学 材料与化工329分求调剂 +11 Mr. Z 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:15 by luoyongfeng
[考研] 263分B区求调剂 +6 李nihao 2026-04-08 6/300 2026-04-08 09:38 by 南开小綦
[考研] 11408 325分 +3 jgtxuxgkx 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:10 by lbsjt
信息提示
请填处理意见