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nigel.lin

银虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】寻求用通用引物进行菌落PCR，无条带的原因

小弟这几天用通用引物进行菌落PCR筛选阳性克隆居然无条带，而阳性对照用空质粒当模板能p出较小的条带；如果是没连上目的基因，也应该出现与阳性对照同大小片段才对啊。很诡异！以前我都这样做都没出现这种情况。请各位资深指点下，非常感谢！！！

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1楼2011-01-04 17:20:32

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DH5a

银虫 (小有名气)

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★
dhd997(金币+1):鼓励交流 2011-01-04 19:06:56
nigel.lin(金币+2):感谢回复 2011-01-04 21:16:33

第一的你的菌是不是很难的溶解导致你的DNA没有释放出来。可以适当把预变性时间延长。第二，增加引物浓度。

赞一下(1人)

2楼2011-01-04 17:51:12

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