24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lianyi1989

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 949.4
帖子: 67
在线: 23.4小时
虫号: 841536

[交流] 【求助/交流】荧光定量pcr出现直线扩增曲线，求指导

最近做的一些列样品中有的样品出现来直线扩怎曲线的现象，不知什么原因，用的SYBR Green的方法，ABI7500仪器。因为其他的样品都没这种问题，所以一开始怀疑cDNA有问题，重新合成了，但是在做仍有这种问题，真是不知道什么原因，求各位同学们给些指导，谢谢大家啦

回复此楼

» 猜你喜欢

HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？已经有0人回复
His标签蛋白纯化怎么才能快？已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有295人回复
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析已经有0人回复
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用已经有0人回复
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点已经有0人回复
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用已经有0人回复
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点已经有0人回复
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？已经有0人回复
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析已经有0人回复
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

1楼 2010-12-30 22:12:42

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

wmjqy

新虫 (初入文坛)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 232.6
帖子: 34
在线: 8.1小时
虫号: 1219002

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

我也是用7500做的。从你的图像看，你这个根本cDNA模版就没有开链。这个可以有很多因素造成：1、退火温度和退火时间不恰当；2、可能根本就没有cDNA模版。如果是没有模版的话，那可能是你逆转录的问题了。在逆转录操作过程中RNA已经降解，或者DNA污染或者蛋白污染等情况都有可能导致逆转录失败，从而没有cDNA的合成。你逆转录之前有没有测量A260/A280，A230/A280比值是多少?如果以上都排除了，那就是你的源头引物有问题了。得重新设计引物了。这是我用7500做的一个扩增曲线图。仅供参考
[

[ Last edited by wmjqy on 2012-5-23 at 23:10 ]