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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】帮忙优化PCR
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毕司英

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】帮忙优化PCR 已有3人参与

目的条带300多bp    mark 250
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1楼 2010-12-30 17:14:55
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你也将你的PCR体系条件等等列出来啊。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2010-12-30 20:00:51
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Michael008

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):good 2010-12-31 08:49:03
有两处比较sharp的条带，应该是有错配。
这么多泳道，不知道你是不是拉了温度梯度。如果是温度梯度，而你的Marker 最下面条带是250 bp的话，左2就还行。如果不是温度梯度PCR的结果，你就可以往高温方向拉个梯度了。条带拖尾应该是胶的问题。
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3楼2010-12-30 21:43:44
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毕司英

新虫 (初入文坛)

条件

★
dhd997(金币+1):鼓励详细交流 2010-12-31 08:49:25
50μl体系
10×buffer                      5μl
dNTP(2.5MM)                 4μl
MgSO4（50mm)              2
1stPCRVλ                                1
Vent                            0.5
H2O                            32.5
上下游引物             各   2.5
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4楼2010-12-31 08:35:18
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毕司英

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-30 20:00:51:
你也将你的PCR体系条件等等列出来啊。

50μl体系
10×buffer                      5μl
dNTP(2.5MM)                 4μl
MgSO4（50mm)              2
1stPCRVλ                                1
Vent                            0.5
H2O                            32.5
上下游引物             各   2.5
本文来自: 小木虫论坛 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2753078&pid=1562260&page=1#pid1562260
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5楼2010-12-31 08:35:54
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