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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】提取质粒
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wangdandelia

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】提取质粒 已有5人参与

大家提质粒后的浓度都是多少呢？
那次看到同学的都好几百ng/uL，而我提的一般都是30-60ng/uL，提过好几种质粒了，都是这样子。。。是我的实验操作有问题呢？还是质粒本来拷贝数就那么低呢？
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1楼 2010-12-27 20:28:51
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
氯霉素是一种蛋白质合成抑制剂，它不杀死活细胞，而是能够抑制染色体的复制，而不影响质粒的复制。这样经过氯霉素处理使得细胞内质粒得到高拷贝。google一下，快失传了，呵呵。
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生命不息，探索不止。
9楼2010-12-28 19:59:11
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
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rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-27 21:53:36
有些质粒就这样子的
我提pcDNA可以超过1ug/ul，但是同样的操作对于psiCHECK-2质粒，顶多就300ng/ul，今天还遇到只有30ng/ul的情况
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2楼2010-12-27 20:45:29
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wangdandelia

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-27 20:45:29:
有些质粒就这样子的
我提pcDNA可以超过1ug/ul，但是同样的操作对于psiCHECK-2质粒，顶多就300ng/ul，今天还遇到只有30ng/ul的情况

哦 我提的都是平均水平30ng/ul,对我后来的酶切都很有影响，量太少了，看来下次需要大提了。。。
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3楼2010-12-27 20:52:39
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-12-27 23:23:13
5ml-10ml菌，250ul,250ul,350ul, 试试。再不行就用氯霉素处理几个小时。
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生命不息，探索不止。
4楼2010-12-27 22:14:06
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