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【求助/交流】PET32a 表达载体和PMD19-T 克隆载体,是否可以用之前养在DH5a里扩增?
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tongxinkxy
银虫
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虫号: 1155390
[交流]
【求助/交流】PET32a 表达载体和PMD19-T 克隆载体,是否可以用之前养在DH5a里扩增?
是否可以只买一次这些载体,然后可以不断的在DH5a里面扩增,就不用再买了?
谢谢解答
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2010-12-18 09:43:52
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ben1147
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小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖交流
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Originally posted by
tongxinkxy
at 2010-12-21 08:46:59:
请问DH5a是否可以扩增,从-20取菌种用?
用pET系列表达载体,然后可以用DH5a当做表达菌株吗?如果不可以,要用什么表达菌株呢?
谢谢
DH5a是克隆菌,不是表达菌,可以用于重组质粒的转化、鉴定,最后要把验证正确的重组质粒提出来转进表达用的菌株。根据载体上用于诱导的启动子来选择表达菌,比如是T7启动子的话,就用T7噬菌体的溶源菌,比如BL21(DE3)之类的
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13楼
2010-12-21 09:04:47
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brightfuture01
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tongxinkxy(金币+1):谢谢 2010-12-18 14:59:44
当然可以的,呵呵。转化到top10或者DH5a里面,然后抽提质粒就OK了。
[
Last edited by brightfuture01 on 2010-12-18 at 10:03
]
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2010-12-18 10:02:44
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Originally posted by
brightfuture01
at 2010-12-18 10:02:44:
当然可以的,呵呵。转化到top10或者DH5a里面,然后抽提质粒就OK了。
[
Last edited by brightfuture01 on 2010-12-18 at 10:03
]
请问两个T载体都可以,对吗?
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2010-12-18 11:24:35
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T载体是线性化的没办法哈~~
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2010-12-18 11:28:37
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