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tongxinkxy

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PET32a 表达载体和PMD19-T 克隆载体，是否可以用之前养在DH5a里扩增？

是否可以只买一次这些载体，然后可以不断的在DH5a里面扩增，就不用再买了？
谢谢解答
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1楼 2010-12-18 09:43:52
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ben1147

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by tongxinkxy at 2010-12-21 08:46:59:

请问DH5a是否可以扩增，从-20取菌种用？
用pET系列表达载体，然后可以用DH5a当做表达菌株吗？如果不可以，要用什么表达菌株呢？
谢谢

DH5a是克隆菌，不是表达菌，可以用于重组质粒的转化、鉴定，最后要把验证正确的重组质粒提出来转进表达用的菌株。根据载体上用于诱导的启动子来选择表达菌，比如是T7启动子的话，就用T7噬菌体的溶源菌，比如BL21（DE3）之类的
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13楼2010-12-21 09:04:47
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
tongxinkxy(金币+1):谢谢 2010-12-18 14:59:44
当然可以的，呵呵。转化到top10或者DH5a里面，然后抽提质粒就OK了。

[ Last edited by brightfuture01 on 2010-12-18 at 10:03 ]
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2楼2010-12-18 10:02:44
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tongxinkxy

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-18 10:02:44:
当然可以的，呵呵。转化到top10或者DH5a里面，然后抽提质粒就OK了。

[ Last edited by brightfuture01 on 2010-12-18 at 10:03 ]

请问两个T载体都可以，对吗？
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3楼2010-12-18 11:24:35
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
T载体是线性化的没办法哈~~
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4楼2010-12-18 11:28:37
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