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tongxinkxy

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】PET32a 表达载体和PMD19-T 克隆载体,是否可以用之前养在DH5a里扩增?

是否可以只买一次这些载体,然后可以不断的在DH5a里面扩增,就不用再买了?
谢谢解答
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ben1147

木虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by tongxinkxy at 2010-12-21 08:46:59:

请问DH5a是否可以扩增,从-20取菌种用?
用pET系列表达载体,然后可以用DH5a当做表达菌株吗?如果不可以,要用什么表达菌株呢?
谢谢

DH5a是克隆菌,不是表达菌,可以用于重组质粒的转化、鉴定,最后要把验证正确的重组质粒提出来转进表达用的菌株。根据载体上用于诱导的启动子来选择表达菌,比如是T7启动子的话,就用T7噬菌体的溶源菌,比如BL21(DE3)之类的
13楼2010-12-21 09:04:47
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tongxinkxy(金币+1):谢谢 2010-12-18 14:59:44
当然可以的,呵呵。转化到top10或者DH5a里面,然后抽提质粒就OK了。

[ Last edited by brightfuture01 on 2010-12-18 at 10:03 ]
2楼2010-12-18 10:02:44
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tongxinkxy

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-18 10:02:44:
当然可以的,呵呵。转化到top10或者DH5a里面,然后抽提质粒就OK了。

[ Last edited by brightfuture01 on 2010-12-18 at 10:03 ]

请问两个T载体都可以,对吗?
3楼2010-12-18 11:24:35
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T载体是线性化的没办法哈~~
4楼2010-12-18 11:28:37
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