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pMD19与pUC19是否可以作为表达载体
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paulajjh
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[交流]
pMD19与pUC19是否可以作为表达载体
如题,在查找pMD19与pUC19时,均提到该两种质粒一般作为克隆质粒,但也可以用于表达外源蛋白,请问各位虫友是否用过这两种作为表达载体的。
另,这两个质粒是否含有终止密码子?
备注:我用pET表达全是包涵体,所以考虑不用强启动子,pMD/pUC说明书上都说可以表达外源蛋白的啊,为什么大家都说不可以呢?
有没自己做过啊?
[
Last edited by paulajjh on 2011-9-3 at 15:00
]
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2011-09-02 16:19:20
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dhd997(金币+2): good 2011-09-03 07:47:11
paulajjh(金币+2): 载体上有lac启动子,可以吗? 2011-09-03 09:07:21
这两个载体的基因序列可以查找到的,你分析下开放阅读框就知道了。如果用于表达外源蛋白的话,载体上还要有你目的基因的启动子的。
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2011-09-02 20:38:09
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paulajjh(金币+1): 不对啊,那pET载体上不是T7启动子,也不是我自身的启动子啊 2011-09-03 14:58:20
那个不是你目的基因的启动子啊,不能启动你目的基因的转录与翻译。所以你还得去查找一下你目的基因的启动子。
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2011-09-03 09:18:56
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paulajjh(金币+1): 不是有lac启动子吗 2011-09-03 14:58:39
dhd997(金币+2): good 2011-09-04 09:50:02
不能,没有启动子吧,还有,终止密码子应该在你的基因上吧
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不能 不能启动你目的基因的转录与翻译
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2011-09-03 09:29:05
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不行的,表达的话,就用pet系统就挺好的
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dhd997(金币+1): good 2011-09-03 12:55:58
pUC19上的启动子一般只用作体外转录RNA, 比如用于原位杂交探针的制备
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2011-09-03 10:59:48
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