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【求助/交流】毕赤酵母表达蛋白的奇怪现象
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| 各位大侠看看有没有见过这种现象！我是将PPICZ&（3.5K）加目的片段（脂肪酶895 bp）转到毕赤酵母X33中去，挑取阳性克隆,测出酶活正常，电泳条带正常（29KD）。理论上29KD的蛋白是不可能透过10KD的超滤膜的，而我将蛋白进行浓缩的时候发现10KD根本起不到浓缩的作用，29KD的蛋白都漏过去了，而酵母自身表达的蛋白却可以浓缩（说明超滤没有问题）。后来我用原始菌产的脂肪酶去超滤，10KD的超滤膜完全能将蛋白截住。我想问下，有没有人遇到过相同的问题，是什么原因！是糖基化程度不够，还是插入的位点不点，还是线性化的位点不对造成的。 |
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梦想天行8楼
2016-10-16 00:37
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