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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 无机/物化 » 无机化学 » 【求助】打断蛋白中二硫键的方法
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孤枫

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】打断蛋白中二硫键的方法

有没有一种试剂，便宜，无毒，能将蛋白中的二硫键还原成巯基，不要像巯基乙酸、β-巯基乙醇那样的有毒试剂，请高手指点啊
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1楼 2010-11-27 17:26:25
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tianjm07

木虫 (著名写手)
★ ★
孤枫(金币+1):谢谢参与
zeng1986kai(金币+1):谢谢应助！ 2010-11-30 09:16:05
金属催化还原呢
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2楼2010-11-27 20:33:36
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孤枫

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by tianjm07 at 2010-11-27 20:33:36:
金属催化还原呢

用什么金属啊，会不会很贵啊
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3楼2010-11-29 14:17:05
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liliinjn

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
孤枫(金币+1):谢谢参与
zeng1986kai(金币+2):谢谢应助！ 2010-11-30 09:16:12
DTT（二硫苏糖醇）也常常被用于蛋白质中二硫键的还原，可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。但DTT往往无法还原包埋于蛋白质结构内部（溶剂不可及）的二硫键，这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性（高温加热或加入变性剂，如6M 盐酸胍、8M 尿素或1% SDS）。反之，根据DTT存在情况下，二硫键还原速度的不同，可以判断其包埋程度的深浅。
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4楼2010-11-29 15:50:06
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tianjm07

木虫 (著名写手)
★
zeng1986kai(金币+1):谢谢应助！ 2010-11-30 09:16:18
引用回帖:
Originally posted by 孤枫 at 2010-11-29 14:17:05:


用什么金属啊，会不会很贵啊

你可以查一些文献，一般比较常用的好像就可以
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5楼2010-11-29 16:34:31
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yuanzhiqin.119

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
孤枫(金币+1):谢谢参与
zeng1986kai(金币+1):谢谢应助！ 2010-11-30 09:16:23
用DTT，二硫代苏糖醇
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6楼2010-11-29 16:56:03
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孤枫

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by liliinjn at 2010-11-29 15:50:06:
DTT（二硫苏糖醇）也常常被用于蛋白质中二硫键的还原，可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。但DTT往往无法还原包埋于蛋白质结构内部（溶剂不可及）的二硫键，这类二硫键的还原常 ...

DTT也很毒啊，而且好贵哦，工业化生产用不合算啊
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7楼2010-11-30 08:03:50
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孤枫

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yuanzhiqin.119 at 2010-11-29 16:56:03:
用DTT，二硫代苏糖醇

有想过这个，不经济，也有毒，工业生产用，最好是高效无毒又经济的
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8楼2010-11-30 08:04:55
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yuzehua

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
孤枫(金币+1): 谢谢参与
houchenxmc: 金币+2, 谢谢参与，欢迎讨论 2013-01-24 10:24:23
由于容易被空气氧化，因此二硫苏糖醇（DTT）的稳定性较差；但冷冻保存或在惰性气体中处理能够延长它的使用寿命。由于质子化的硫的亲核性较低，随着pH值的降低，DTT的有效还原性也随之降低；而Tris(2-carboxyethyl)phosphine HCl（TCEP盐酸盐）可以作为低pH值条件下DTT的替代品，而且也比DTT更为稳定。
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9楼2013-01-23 21:10:53
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clark001

新虫 (初入文坛)
★
孤枫(金币+1): 谢谢参与
半胱氨酸呢，cysteine
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10楼2014-03-16 07:47:32
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52Jasmine

木虫 (著名写手)
★
孤枫(金币+1): 谢谢参与
TCEP
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11楼2014-10-28 15:50:40
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考哪里好呢

新虫 (初入文坛)
★
孤枫(金币+1): 谢谢参与
请问楼主最后找到一种试剂，便宜，无毒，能将蛋白中的二硫键还原成巯基，不要像巯基乙酸、β-巯基乙醇那样的有毒试剂吗？
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13楼2015-11-04 22:39:19
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fln漂流瓶12楼
2014-10-28 16:09   回复  
孤枫(金币+1): 谢谢参与
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