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海洋之滨木虫 (正式写手)
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DTT会打开金硫键吗？
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实验中用到含DTT的一个蛋白，蛋白溶液在金电极上反应一段时间后，阻抗明显减小，电极上只有巯基DNA和巯基己烷，确定是因为DTT的存在。不知道是因为DTT打开了金硫键还是因为二硫键的存在，怎么去除DTT或者怎么消除影响？ [ 来自科研家族 纳米技术 ] |
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DTT自身带的两个巯基也可以跟金电极络合。 建议楼主看看这篇文献, The Structure of Dithiothreitol Monolayers on Au(111) http://bolt.lakeheadu.ca/~physww ... surface_grp/DTT.pdf 排除DTT的干扰，建议你用不含巯基的还原剂，比如硼氢化钠，TCEP |
2楼2012-12-11 23:13:27
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Or consider desalting, but it is much more laborious. ``Dimerization greatly lowers the efficiency of subsequent coupling reactions such as DNA immobilization on gold in biosensors. Typically DTT is mixed with a DNA solution and allowed to react, and then is removed by filtration (for the solid catalyst) or by chromatography (for the liquid form). The DTT removal procedure is often called "desalting."`` ---Wikipedia |
3楼2012-12-11 23:17:17
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5楼2012-12-12 10:24:35
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文献里有报道DTT、巯基乙醇等会让巯基修饰的DNA脱离金表面，你可以看下A Bio-Bar-Code Assay Based upon Dithiothreitol-Induced Oligonucleotide Release，A Bio-Bar-Code Assay Based upon Dithiothreitol-Induced Oligonucleotide Release，至于怎么解决我还没有好的办法，我也遇到过就是自己配置缓冲体系不加DTT，如果本身含有稀释一下看能不能解决，持续关注 |
6楼2012-12-12 15:50:51
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