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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 纳米生物材料 » DTT会打开金硫键吗？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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海洋之滨

木虫 (正式写手)

coffee dependent

[求助] DTT会打开金硫键吗？

实验中用到含DTT的一个蛋白，蛋白溶液在金电极上反应一段时间后，阻抗明显减小，电极上只有巯基DNA和巯基己烷，确定是因为DTT的存在。不知道是因为DTT打开了金硫键还是因为二硫键的存在，怎么去除DTT或者怎么消除影响？

[ 来自科研家族 纳米技术 ]
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不多时暮霭风吹散，西山看我，我看西山。
1楼 2012-12-11 19:49:42
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

aircraftvip

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 专家考核, 欢迎来到生物功能材料板块应助交流 2012-12-12 00:15:13
海洋之滨: 金币+10, ★有帮助 2012-12-12 10:17:52
DTT自身带的两个巯基也可以跟金电极络合。
建议楼主看看这篇文献,
The Structure of Dithiothreitol Monolayers on Au(111)
http://bolt.lakeheadu.ca/~physww ... surface_grp/DTT.pdf

排除DTT的干扰，建议你用不含巯基的还原剂，比如硼氢化钠，TCEP
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格物致知，知行合一
2楼2012-12-11 23:13:27
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普通回帖

aircraftvip

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
海洋之滨: 金币+20, ★有帮助 2012-12-12 10:18:01
Or consider desalting, but it is much more laborious.
``Dimerization greatly lowers the efficiency of subsequent coupling reactions such as DNA immobilization on gold in biosensors. Typically DTT is mixed with a DNA solution and allowed to react, and then is removed by filtration (for the solid catalyst) or by chromatography (for the liquid form). The DTT removal procedure is often called "desalting."``
---Wikipedia
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格物致知，知行合一
3楼2012-12-11 23:17:17
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红舟流星

荣誉版主 (文坛精英)

志在成为千元户！

优秀版主优秀版主优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by aircraftvip at 2012-12-11 23:17:17
Or consider desalting, but it is much more laborious.
``Dimerization greatly lowers the efficiency of subsequent coupling reactions such as DNA immobilization on gold in biosensors. Typically DTT i ...

怎么不去http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=4945856&page=8&fpage=领取十一月季军奖励啊？
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红楼一梦终难寻扁舟载酒且慢行落花流水依惜别月伴明星照前路
4楼2012-12-12 00:15:47
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海洋之滨

木虫 (正式写手)

coffee dependent
引用回帖:
2楼: Originally posted by aircraftvip at 2012-12-11 23:13:27
DTT自身带的两个巯基也可以跟金电极络合。
建议楼主看看这篇文献,
The Structure of Dithiothreitol Monolayers on Au(111)
http://bolt.lakeheadu.ca/~physwww/facNstaff/gallagher/surface_grp/DTT.pdf

排除 ...

有可能DTT上的巯基取代了原来的DNA和封闭剂或者原来的-SH因为形成二硫键而二硫键也能与金作用，DTT又恰好能打断二硫键。但实验过程中因为DTT的存在几乎能把修饰电极变成裸电极，所以还是很疑惑。 另外，DTT本身是还原剂，是不是需要氧化剂来消除？？？
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不多时暮霭风吹散，西山看我，我看西山。
5楼2012-12-12 10:24:35
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evowill

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
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海洋之滨: 金币+70, ★有帮助 2012-12-12 15:57:19
文献里有报道DTT、巯基乙醇等会让巯基修饰的DNA脱离金表面，你可以看下A Bio-Bar-Code Assay Based upon Dithiothreitol-Induced Oligonucleotide Release，A Bio-Bar-Code Assay Based upon
Dithiothreitol-Induced Oligonucleotide Release，至于怎么解决我还没有好的办法，我也遇到过就是自己配置缓冲体系不加DTT，如果本身含有稀释一下看能不能解决，持续关注
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6楼2012-12-12 15:50:51
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solely

木虫 (小有名气)
我现在实验用到DTT的作用就是打开二硫键，所以他肯定是会还原二硫键的
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生命不息，奋斗不止
7楼2012-12-12 17:11:24
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aircraftvip

专家顾问 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by evowill at 2012-12-12 15:50:51
文献里有报道DTT、巯基乙醇等会让巯基修饰的DNA脱离金表面，你可以看下A Bio-Bar-Code Assay Based upon Dithiothreitol-Induced Oligonucleotide Release，A Bio-Bar-Code Assay Based upon
Dithiothreitol-Induc ...

DTT会让巯基修饰的DNA脱离金表面的机理是什么？ 持续期待答案
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格物致知，知行合一
8楼2012-12-12 19:20:42
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evowill

新虫 (初入文坛)
★
红舟流星: 金币+1, 欢迎新虫来到生物功能材料板块积极交流 2012-12-13 00:03:41
引用回帖:
8楼: Originally posted by aircraftvip at 2012-12-12 19:20:42
DTT会让巯基修饰的DNA脱离金表面的机理是什么？ 持续期待答案...

巯基乙醇的作用是取代，DTT作用可能还是类似于DTT还原二硫键吧，这篇AC里也就应用了这个机理没多做解释
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9楼2012-12-12 19:59:45
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liuanan

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
红舟流星: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎来到生物功能材料板块积极交流 2012-12-13 00:03:59
都是巯基与金的配位键结合，是竞争性反应的过程。这个机理不需要解释啊
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10楼2012-12-12 20:50:32
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