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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】PCR 的时候引物是结合在最后的产物上面的么 ? 已有5人参与

疑惑啊 ~~~
RT,应该是这样子的不然TRFLP的检测以及DGGE的GC夹子的作用怎么实现啊~
我的问题,是用 pMD19-T Simple Vector 特异的M13引物扩增目的片段的时候,最终扩增到的质粒上面是不是就掺入了M13引物的序列?也就是说最后得到的质粒在目的片段的两端各加上了两个引物序?
谁来帮我 解答下吧~~~
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

是的,必须的
2楼2010-11-18 09:18:17
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bigbangrex

铁杆木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
最后一步是72°延伸10分钟吧,应该引物已经结合在上面并延伸了吧。
3楼2010-11-18 09:59:41
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by bigbangrex at 2010-11-18 09:59:41:
最后一步是72°延伸10分钟吧,应该引物已经结合在上面并延伸了吧。

不得
我想知道用质粒特异的引物p出来的是圆形的的还是线性的 ???
4楼2010-11-18 13:55:24
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won7

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
PCR产物都是线性的的。
5楼2010-11-18 16:08:26
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zier1011

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 老夏853 at 2010-11-18 13:55:24:

不得
我想知道用质粒特异的引物p出来的是圆形的的还是线性的 ???

我还头一次听说PCR产物能是圆形的!
PCR产物是线性的,两端带有你的引物序列
花还香香的
6楼2010-11-18 16:42:17
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