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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR 的时候引物是结合在最后的产物上面的么 ？
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】PCR 的时候引物是结合在最后的产物上面的么 ？ 已有5人参与

疑惑啊 ~~~
RT，应该是这样子的不然TRFLP的检测以及DGGE的GC夹子的作用怎么实现啊~
我的问题，是用 pMD19-T Simple Vector 特异的M13引物扩增目的片段的时候，最终扩增到的质粒上面是不是就掺入了M13引物的序列？也就是说最后得到的质粒在目的片段的两端各加上了两个引物序？
谁来帮我 解答下吧~~~
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1楼 2010-11-18 09:15:13
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bigbangrex

铁杆木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
最后一步是72°延伸10分钟吧，应该引物已经结合在上面并延伸了吧。
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3楼2010-11-18 09:59:41
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by bigbangrex at 2010-11-18 09:59:41:
最后一步是72°延伸10分钟吧，应该引物已经结合在上面并延伸了吧。

不得
我想知道用质粒特异的引物p出来的是圆形的的还是线性的 ？？？
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4楼2010-11-18 13:55:24
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won7

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
PCR产物都是线性的的。
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5楼2010-11-18 16:08:26
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zier1011

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 老夏853 at 2010-11-18 13:55:24:

不得
我想知道用质粒特异的引物p出来的是圆形的的还是线性的 ？？？

我还头一次听说PCR产物能是圆形的！
PCR产物是线性的，两端带有你的引物序列
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花还香香的
6楼2010-11-18 16:42:17
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