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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】引物的PCR Tm值 请教
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lilirong2009

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】引物的PCR Tm值 请教

我设计了几种引物，长度都为18bp，用公式 Tm=4(G+C)+2(A+T)-5℃  计算得Tm值为43℃左右，那PCR时按算法 Tm-5℃ 设退火温度时，退火温度就只有三十几摄氏度了，这样设的话退火温度是不是太低？合理吗？怎么设置退火温度比较合理啊？
我其中一对引物为 5‘-AAGACTCCTATCACTATG-3’  Tm 45℃
                             5‘-TAAAAGATTTGTGGCATA-3’  Tm 41℃

       谢谢指教!

[ Last edited by lilirong2009 on 2010-11-17 at 17:27 ]
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1楼 2010-11-17 17:19:24
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