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【求助/交流】SDS-PAGE电泳问题
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shyuyafeng
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[交流]
【求助/交流】SDS-PAGE电泳问题
我跑的样品是蛋白,最近跑电泳的时候,样品刚进入分离胶的时候成线状,但是过了一会就开始弥散,昨天今天都是这样,昨天浓缩胶是80v,分离胶是100v,昨天晚上看了点资料别人说可能是电压的问题,今天把分离胶的电压降低了还是弥散。分离胶和浓缩胶的pH没有问题,电泳液也是新配的,
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2010-11-13 15:53:10
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piaopiao233
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★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-11-15 23:08:44
shyuyafeng(金币+3):谢谢,我已经发现问题了。 2010-11-16 16:52:29
你看的时候不光要看电压
一般我们是保持电流的恒定,所以有时候电压会上下浮动一点,要不然会跑的很慢之类的。
还有你的样品是怎么制得的?上样缓冲液有没有什么问题?你的蛋白marker在电泳过程中也出现弥散吗?
建议你先看看样品,确定没什么问题再看胶。
以前这个仪器别人用的时候有没有什么问题?换个浓度试试?换别人的样试一试?
多试几次肯定就明白了
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14楼
2010-11-15 19:15:51
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375433261
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★ ★
shyuyafeng(金币
+1
):谢谢参与
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-11-13 16:03:39
应该不是电压的问题,我就是用这样的电压跑的 ,跑出的条带挺好的,应该是你的样品浓度太高了,或者是分离胶的配方有问题 电压肯定是没问题的
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2010-11-13 15:59:37
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★
shyuyafeng(金币
+1
):谢谢参与
弥撒是不是你的交联剂temed有问题或配比当啊 电压我们浓缩80v 分离胶120v
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2010-11-13 16:36:06
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Originally posted by
375433261
at 2010-11-13 15:59:37:
应该不是电压的问题,我就是用这样的电压跑的 ,跑出的条带挺好的,应该是你的样品浓度太高了,或者是分离胶的配方有问题 电压肯定是没问题的
15%的分离胶 配方是按分子生物手册上配的肯定没问题,样品浓度高会导致弥散吗?
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2010-11-13 17:51:23
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