24小时热门版块排行榜    

查看: 6014  |  回复: 23

laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家

[交流] 【求助】求助:乙酰胆碱酯酶溶液的配制问题 已有8人参与

文献上说来自电鳗的乙酰胆碱酯酶AChE (lyophilised powder; 292 U/mg solid; 394 U/mg protein),请问它的单位是什么意思啊?

还有就是我如果购买500U/mg 的酶(或者是2000U/ mg) ,那么如何将它配制成1000U/mL的溶液呢?是直接用去离子水溶解还是其他什么缓冲液啊?

一般酶溶液制备后能存放多久呢?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

乙酰胆碱酯酶

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

想想现在,有事可做,即是幸福~
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liutaoliu

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
qinhy(金币+1):多谢指教,欢迎常来药学版! 2010-12-12 18:35:08
第一个问题在网络或课本上很容易查到,以后不许偷懒啊,呵呵。U----酶活力的度量单位。1961年国际酶学会议规定:1个酶活力单位是指在特定条件(25℃,其它为最适条件)下,在1分钟内能转化1微摩尔底物的酶量,或是转化底物中1微摩尔的有关基团的酶量。
第二个问题,U/mg是用来计算你买的酶的量,你要是用2000U/mg的酶配1000U/mL的溶液,就用2000U/mg乘以酶的质量(说明书上有)再除以1000U/mL,就算出体积了。一般用PBS缓冲溶液,可能也有用其他的。pH中性左右,配完后冷冻保存,用的话,拿出一些于4摄氏度保存,尽量快点用,放置时间不宜过长。几个月是没问题的。
开心就笑,不开心就等会儿再笑
5楼2010-12-12 09:56:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

dixiaxia

禁虫 (小有名气)

laiyin_111(金币+10):没人回答,就送你吧!你运气真好!O(∩_∩)O哈哈~ 2010-10-21 12:38:23
本帖内容被屏蔽

2楼2010-10-17 21:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家

引用回帖:
Originally posted by laiyin_111 at 2010-10-16 17:21:00:
文献上说来自电鳗的乙酰胆碱酯酶AChE (lyophilised powder; 292 U/mg solid; 394 U/mg protein),请问它的单位是什么意思啊?

还有就是我如果购买500U/mg 的酶(或者是2000U/ mg) ,那么如 ...

紧急求助

[ Last edited by laiyin_111 on 2010-10-17 at 21:58 ]
想想现在,有事可做,即是幸福~
3楼2010-10-17 21:56:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家

引用回帖:
Originally posted by dixiaxia at 2010-10-17 21:55:07:
学习。。。

夏夏你这头像,呵呵~~
想想现在,有事可做,即是幸福~
4楼2010-10-17 22:00:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家

引用回帖:
Originally posted by liutaoliu at 2010-12-12 09:56:37:
第一个问题在网络或课本上很容易查到,以后不许偷懒啊,呵呵。U----酶活力的度量单位。1961年国际酶学会议规定:1个酶活力单位是指在特定条件(25℃,其它为最适条件)下,在1分钟内能转化1微摩尔底物的酶量,或是 ...

呵呵,非常感谢你的帮助!我明天正好就要去配酶溶液了呵呵,你的回复真及时真好~哈哈
谢谢你!我已经明白啦!呵呵,以后我不偷懒了,得好好做实验好好查文献好好学习~(*^__^*) 嘻嘻……
想想现在,有事可做,即是幸福~
6楼2010-12-12 12:39:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
送鲜花一朵
7楼2011-10-09 21:37:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

想念紫叶李

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by laiyin_111 at 2010-12-12 12:39:56
呵呵,非常感谢你的帮助!我明天正好就要去配酶溶液了呵呵,你的回复真及时真好~哈哈
谢谢你!我已经明白啦!呵呵,以后我不偷懒了,得好好做实验好好查文献好好学习~(*^__^*) 嘻嘻……...

楼主,想请问下你,你是用什么溶液来配乙酰胆碱酯酶的母液,而且浓度多大比较合适啊?
8楼2013-04-24 20:11:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家

引用回帖:
8楼: Originally posted by 想念紫叶李 at 2013-04-24 00:11:16
楼主,想请问下你,你是用什么溶液来配乙酰胆碱酯酶的母液,而且浓度多大比较合适啊?...

10 U/mL储备液:将500 U/mg的AChE灰白色固体粉末用缓冲液A溶解,定容至50 mL量瓶中,摇匀即得;
0.22 U/mL工作液:取220 μL的10 U/mL储备液,用缓冲液B溶解,定容至10 mL量瓶中,摇匀即得。

其中,缓冲液A:50 mM Tris-HCl,pH 8.0;
称取3.03 g Tris,精密称定,加入到375 mL去离子水中,在电磁搅拌下滴加浓盐酸至pH 8.0 (25℃),再向其中加入去离子水,定容至500 mL量瓶中,即得。
缓冲液B:50 mM Tris-HCl,pH 8.0,含有0.1%(w/v)牛血清白蛋白(BSA),用来稳定酶;
称取0.05 g BSA,精密称定后用缓冲液A溶解,定容至50 mL量瓶中,摇匀即得(注意BSA容易产生气泡,所以定容时不要剧烈振摇,要轻轻操作,防止产生气泡)。
想想现在,有事可做,即是幸福~
9楼2013-04-24 21:14:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laiyin_111

木虫 (正式写手)

梦想家

引用回帖:
8楼: Originally posted by 想念紫叶李 at 2013-04-24 00:11:16
楼主,想请问下你,你是用什么溶液来配乙酰胆碱酯酶的母液,而且浓度多大比较合适啊?...

10U/mL的储备液我用具塞塑料试管分装后冻存于-20°冰箱中。
想想现在,有事可做,即是幸福~
10楼2013-04-24 21:18:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 laiyin_111 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +6 启萌科技 2026-08-12 21/1050 2026-08-14 19:48 by 启萌科技
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见