应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于测葡萄糖氧化酶的米氏常数的问题，求教
61/1返回列表
查看: 2470  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

creepon

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于测葡萄糖氧化酶的米氏常数的问题，求教 已有1人参与

不知道谁有做过葡萄糖氧化酶或者类似酶的米氏常数。就是在相同浓度的GOD下，加入不同浓度的底物，测它们的初速度，然后根据图求出米氏常数。
现在就有一个问题，就是god氧化需要水中溶解氧参与。而水中溶解氧我查了下也才0.25mM。
所以我应该要控制反应时间避免让氧气消耗完。那岂不是我反应最多只生成0.25mM的H2O2了，或者反应最多只消耗0.25mM的葡萄糖了？

我看了下文献，感觉它们都进行好长时间啊，我算了下最终生产的产物或者消耗的葡萄糖都大于1mM了。我哪里弄错了？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-04-09 22:12:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

truemoon

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我做过氧化酶的米氏常数，做之前并没有像你那样查水中的溶解氧问题，因为这是个平衡问题，有消耗就会有新的氧溶解在水中，你只要按照常规的方法去做，做到多少就算多少，不用刻意强求。当然，文章中的数据一般都是做过很多次测试取最好的结果的。
赞一下 回复此楼
一条懒虫子
2楼2013-04-10 11:38:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

creepon

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by truemoon at 2013-04-10 11:38:51
我做过氧化酶的米氏常数，做之前并没有像你那样查水中的溶解氧问题，因为这是个平衡问题，有消耗就会有新的氧溶解在水中，你只要按照常规的方法去做，做到多少就算多少，不用刻意强求。当然，文章中的数据一般都是做 ...

我也打算就这样做了。
请教下，你当时是测GOD米氏常数具体过程是怎样的？能详细说说吗
比如，你酶多少U，glucose浓度是哪几个浓度，反应了多久。

感谢
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-10 19:18:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

truemoon

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我是通过走it曲线测的，时间一直测到电流不再增长为止，先算去线性范围，根据线性范围可以算出米氏常熟。助于酶多少u看你的具体情况而论，没有可比性，浓度也没有可比性，你自己多配几个浓度试试。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

creepon
一条懒虫子
4楼2013-04-11 08:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

creepon

铁虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by truemoon at 2013-04-11 08:51:11
我是通过走it曲线测的，时间一直测到电流不再增长为止，先算去线性范围，根据线性范围可以算出米氏常熟。助于酶多少u看你的具体情况而论，没有可比性，浓度也没有可比性，你自己多配几个浓度试试。

你是测固定在电极上的酶还是溶液中的酶？
如果是溶液中的酶话。那你应该是将酶跟底物混合，然后开始测电流。最后做出I-t曲线。这时候你怎么根据这个I-t曲线算出反应初速度v？是取反应刚开始的几个点，根据标准工作曲线，做出产物H2O2跟t的P-t图。然后再算出反应初速度的吗？
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-11 09:31:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Aneurin

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
6楼2017-03-08 16:18:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 creepon 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-16 02:02 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +6 两三岁ss 2026-09-14 6/300 2026-09-15 20:17 by 只吃肉葡萄
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:23 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:11 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-15 18:47 by CgyNCDVNhGVg
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:59 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 17:35 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:39 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 16:15 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 3/150 2026-09-15 15:27 by CgyNCDVNhGVg
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 15:02 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 7/350 2026-09-15 14:49 by VMDqgnlKimtZ
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-15 14:25 by VMDqgnlKimtZ
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:58 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:14 by C79jjtjAKjEn
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-15 06:38 by 5BDX0d0WFp7t
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-14 23:13 by vZfe6xYu34yj
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭