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Doris99

金虫 (小有名气)

[求助] 急求:有关BSA溶液

本人想做抗蛋白质吸附试验,用PBS溶液配制的BSA溶液,为什么BSA溶液放置一段时间后变浑浊了呢?用紫外分光光度计测试BSA的浓度,结果是越来越大,为什么呢?我都快愁死了~第一次做这方面的,很不懂,哪位大神帮帮我啊~~~
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jonehwa

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-07-15 22:11:23
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2013-07-15 22:14:25
Doris99: 金币+2, 有帮助, 谢谢哈~ 2013-07-16 07:46:10
目测有可能染菌了,最好现配现用。
2楼2013-07-15 10:24:44
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r123ed

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-07-15 22:11:10
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2013-07-15 22:14:34
Doris99: 金币+2, 有帮助 2013-07-16 07:47:24
正常 不浑浊反而不正常
就是不加BSA,PBS过几天还可能有沉淀析出,更何况你加了BSA,跟形核剂一样,肯定要浑浊了。。。
一般都是现用现配,做实验不行就用水溶BSA,不过时间长了BSA也是会降解的,就是有一种臭鸡蛋的味道,你懂得。
shape memory
3楼2013-07-15 18:39:32
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aircraftvip

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
红舟流星: 金币+1, 专家考核, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-07-15 22:11:17
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2013-07-15 22:14:44
Doris99: 金币+1, 有帮助 2013-07-16 07:48:07
BSA有一个Cys-34半胱氨酸,长期放置会生成分子间二硫键。理论上你加入还原剂,沉淀会逐渐消失。
格物致知,知行合一
4楼2013-07-15 18:42:55
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Doris99

金虫 (小有名气)

那一般可以撑多长时间啊?我这个时间太短的话感觉是不是说明不了问题啊~
开心就好!
5楼2013-07-16 07:48:58
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jonehwa

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Doris99 at 2013-07-16 07:48:58
那一般可以撑多长时间啊?我这个时间太短的话感觉是不是说明不了问题啊~

推荐加入0.1%的叠氮钠。(此物剧毒,小心操作。)
6楼2013-07-16 08:33:17
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Doris99

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by jonehwa at 2013-07-16 08:33:17
推荐加入0.1%的叠氮钠。(此物剧毒,小心操作。)...

叠氮钠是有毒的?那我加入它的话会不会影响蛋白质的吸附效果啊?
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7楼2013-07-17 09:17:46
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tmiao

木虫 (小有名气)

我觉得是因为PBS中的盐溶液使得BSA变性了,不知道楼主的BSA是什么浓度,我之前有用BSA做药物模型释放曲线用UV,结果还不错。时间久了,BSA也会这样。因为你变浑浊了,UVabsorptance自然度数变大,但是这不一定是你镇长的BSA浓度。
哈哈
8楼2013-07-19 01:23:14
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Doris99

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by tmiao at 2013-07-19 01:23:14
我觉得是因为PBS中的盐溶液使得BSA变性了,不知道楼主的BSA是什么浓度,我之前有用BSA做药物模型释放曲线用UV,结果还不错。时间久了,BSA也会这样。因为你变浑浊了,UVabsorptance自然度数变大,但是这不一定是你镇 ...

我的BSA溶液浓度为1mg/mL,PBS的PH值为7.4,我想问下配置的BSA溶液存放条件是什么呢?多少温度存放?
开心就好!
9楼2013-07-19 17:02:40
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xiaozhufei4

新虫 (初入文坛)

我们一般放在4度的冰箱里,但是保质期不长,如果想长时间存放要加防腐剂,但是做实验肯定加不了,所以还是一次少配,多配几次
10楼2013-10-13 13:00:57
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