应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】ECORI酶切反应体系体积可加大吗
51/1返回列表
查看: 1847  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

lilirong2009

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】ECORI酶切反应体系体积可加大吗 已有1人参与

我想用限制性内切酶EcoRI酶切从金黄色葡萄球菌中提取的总DNA大约100微升，不知道是否可将EcoRI酶切反应体系加大到相应倍数，体系中所加试剂是否可加大到相应倍数 ？
这样的话，EcoRI酶切反应条件好控制吗？不会切不出来吧？

[ Last edited by lilirong2009 on 2010-10-9 at 10:08 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-10-09 09:54:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

virus2009

金虫 (正式写手)

人称 龙哥
★
lilirong2009(金币+2):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by gbrillia at 2010-10-09 10:02:04:
可以按照倍数加大酶的用量，例如10微升体系一般加入0.5微升的酶，100微升体系就加入5微升酶，体系中的buffer也加倍。
但是我觉得用大体系做酶切的效果不如小体系的好，你可以分成两个50微升的做

看你用什么样的酶了？你100ul体系用酶加5u，够我切500ul了，LZ可以根据你提取的量和酶活单位加酶，体系可相应的扩大。l
赞一下(1人) 回复此楼
virus
6楼2010-10-09 21:01:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

gbrillia

银虫 (小有名气)
★ ★
lilirong2009(金币+2):谢谢参与
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~ 2010-10-09 10:36:40
可以按照倍数加大酶的用量，例如10微升体系一般加入0.5微升的酶，100微升体系就加入5微升酶，体系中的buffer也加倍。
但是我觉得用大体系做酶切的效果不如小体系的好，你可以分成两个50微升的做
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-10-09 10:02:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feng__

金虫 (著名写手)

雾~蝶
★ ★ ★
lilirong2009(金币+2):谢谢参与
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-10-09 23:30:32
不是菌液直接酶切吧如果是质粒的话，可以直接扩大倍数，但是怎么也用不了那么大的体积啊。做连接，鉴定什么的都用20就够了
赞一下(2人) 回复此楼
会不会偶尔也会想起我....
3楼2010-10-09 10:05:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

walker2898

银虫 (小有名气)
★ ★
lilirong2009(金币+2):谢谢参与
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-10-09 23:30:36
我觉得一楼说的比较好，你可以分成小体积酶切，然后再混到一起就可以了，可以考虑适当延长酶切时间。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-10-09 10:37:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 h4CP7TrQR8Lg 2026-08-22 3/150 2026-08-23 16:30 by lXgU0RvNTDC9
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 15:18 by KM5EcsNQRBPn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 6/300 2026-08-23 14:21 by KM5EcsNQRBPn
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +15 羊腰板 2026-08-21 16/800 2026-08-23 10:45 by process2012
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 10:44 by IXZuIJ2Q7OVy
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +12 大萍1987 2026-08-20 14/700 2026-08-23 10:30 by wrm
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 07:41 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 04:04 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:43 by OEbVnUOu01ol
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭