24小时热门版块排行榜    

查看: 1838  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lilirong2009

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】ECORI酶切反应体系体积可加大吗 已有1人参与

我想用限制性内切酶EcoRI酶切从金黄色葡萄球菌中提取的总DNA大约100微升,不知道是否可将EcoRI酶切反应体系加大到相应倍数,体系中所加试剂是否可加大到相应倍数 ?
这样的话,EcoRI酶切反应条件好控制吗?不会切不出来吧?

[ Last edited by lilirong2009 on 2010-10-9 at 10:08 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

walker2898

银虫 (小有名气)

★ ★
lilirong2009(金币+2):谢谢参与
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-10-09 23:30:36
我觉得一楼说的比较好,你可以分成小体积酶切,然后再混到一起就可以了,可以考虑适当延长酶切时间。
4楼2010-10-09 10:37:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

gbrillia

银虫 (小有名气)

★ ★
lilirong2009(金币+2):谢谢参与
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~ 2010-10-09 10:36:40
可以按照倍数加大酶的用量,例如10微升体系一般加入0.5微升的酶,100微升体系就加入5微升酶,体系中的buffer也加倍。
但是我觉得用大体系做酶切的效果不如小体系的好,你可以分成两个50微升的做
2楼2010-10-09 10:02:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feng__

金虫 (著名写手)

雾~蝶

★ ★ ★
lilirong2009(金币+2):谢谢参与
scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-10-09 23:30:32
不是菌液直接酶切吧如果是质粒的话,可以直接扩大倍数,但是怎么也用不了那么大的体积啊。做连接,鉴定什么的都用20就够了
会不会偶尔也会想起我....
3楼2010-10-09 10:05:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子火箭兵

金虫 (正式写手)


lilirong2009(金币+2):谢谢参与
加大倒是没问题,不过使用EcoRI是一定要注意酶切条件(包括buffer、酶切温度等等)很可能导致星号活性反应
5楼2010-10-09 20:20:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +22 yaoyewhu2008 2026-08-20 24/1200 2026-08-21 07:44 by DanielDDDD
[基金申请] 基金啊基金 +3 longfie172 2026-08-20 3/150 2026-08-21 00:04 by wuchongjun
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+3 snowwithsea 2026-08-19 12/600 2026-08-20 15:56 by lfy8008
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见