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本帖产生 1 个 食品EPI ,点击这里进行查看

小心点

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】乳酸菌保藏问题

我们实验室自己分了一些植物乳杆菌菌种,平时用15%甘油保藏在-70℃,但是我发现很多菌种保藏的时间一长,性状会出现很大的衰退,甚至到最后都划线划不出来了,培养基用的是普通的MRS培养基,请问大侠们,这个究竟是为什么啊?
怎么保藏乳酸菌最好呢?
有没有复壮乳酸菌的好办法呢?
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
树树8013(金币+2): 很不错的回帖,谢谢交流提示。版主奖励。 2012-01-04 13:16:07
树树8013: 回帖置顶 2012-01-04 13:16:08
sweety(食品EPI+1): 鼓励精彩回帖,希望再接再厉,这个帖子毕竟时间久了些 2012-01-04 16:56:01
我想这个一般不会有人直接告诉你怎么做,因为在很多老板那里这个是涉及保密的。真的,你可以问你在做乳酸菌方面的同学,如东北农大、内蒙农大的。这两个学校做乳酸菌还是比较在行的。

我建议:1乳酸菌保护剂:10%脱脂乳+8%乳糖+1%谷氨酸钠+0.1%Vc,原理很简单,根据乳酸菌生物特性和抗低温保护。
    2真空冷冻干燥保护效果最好,一般存放十几年都没有任何问题。
    3复原用10%脱脂乳+0.1%酵母粉。原理:乳酸菌最好的营养成分来自于乳
IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
10楼2012-01-04 11:28:10
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韩俊

金虫 (正式写手)


冰雪灵魂(金币+1):欢迎回帖交流,欢迎常来食品板块~~ 2010-10-03 20:53:38
小心点(金币+3):谢谢~ 2010-10-04 10:14:54
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???????????????????????????????????????????????50ml???????????????30ml 50?????? ?? 20?? ??????????? ?? -85???????±???ü?????????????У?pH????3??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????/???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????С?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????

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2楼2010-10-03 20:20:49
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普通回帖

小心点

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 韩俊 at 2010-10-03 20:20:49:
可以先用液体培养基富集,如果均悬液混浊后再划线接种;
乳酸菌的生存条件很宽。因为它是原核生物,结构相对简单。可以用50ml饱和脱脂奶粉溶液+30ml 50%甘油 + 20% 对数期细菌原液 在 -85度条件下保存好几年 ...

问题是菌种往往在菌悬液中生长良好,但是在平板上就是不长,很奇怪,我也是选取对数期的菌种保存的,是不是培养基中乳酸积累过多,导致菌体死亡啊?是不是把菌离心下来保藏更好呢?谢谢~
3楼2010-10-04 10:17:14
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jiejie521

金虫 (正式写手)

学习一下,
很高兴来到这里,希望有所提高
4楼2011-07-13 14:20:27
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美眷faye

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我也遇到过这种情况 包藏方法没问题 复壮的时候先液体传代一次 长浑浊了 在划线传代 划线的时候多沾点菌液 如果不行就多液体传代几次在划线  在平板上要长个三四天才能看到有菌落  所以不要着急
5楼2011-11-15 10:15:34
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839967781

木虫 (职业作家)

遇到过这种情况 包藏方法没问题 复壮的时候先液体传代一次 长浑浊了 在划线传代 划线的时候多沾点菌液 如果不行就多液体传代几次在划线  在平板上要长个三四天才能看到有菌落  所以不要着急
6楼2011-11-15 10:52:35
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hopebiolqdhb

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
现在有种叫瓷珠菌种保存管的东西,不知道能否保存乳酸菌,我们保存过许多菌种,没做过乳酸菌
培养基
7楼2011-11-15 14:07:04
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2008228003

铁虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
树树8013(金币+2): 2012年请继续关注我们自己的食品板块。 2012-01-02 13:16:56
我用的是植物乳杆菌,非常皮实。根本不存在衰退的问题。
一般复壮的都是因为乳糖的问题吧
这个得结合你那株菌的用途性质
建议你还是查下伯杰氏细菌手册 搞清楚些
8楼2011-11-23 16:26:26
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huangjixiang

捐助贵宾 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
树树8013(金币+1): 鼓励新虫友发贴讨论。 2012-01-02 13:17:14
乳酸菌要长期保存菌种最好是用冷冻干燥,在MRS液体中培养好后搜集菌体,与保护剂混合后冻干。
9楼2011-12-30 21:48:22
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