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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 微生物、发酵 » 【求助】乳酸菌保藏问题
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小心点

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】乳酸菌保藏问题

我们实验室自己分了一些植物乳杆菌菌种，平时用15%甘油保藏在-70℃，但是我发现很多菌种保藏的时间一长，性状会出现很大的衰退，甚至到最后都划线划不出来了，培养基用的是普通的MRS培养基，请问大侠们，这个究竟是为什么啊？
怎么保藏乳酸菌最好呢？
有没有复壮乳酸菌的好办法呢？
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1楼2010-10-03 17:25:48
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huangjixiang

捐助贵宾 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
树树8013(金币+1): 鼓励新虫友发贴讨论。 2012-01-02 13:17:14
乳酸菌要长期保存菌种最好是用冷冻干燥，在MRS液体中培养好后搜集菌体，与保护剂混合后冻干。
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9楼2011-12-30 21:48:22
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韩俊

金虫 (正式写手)
★
冰雪灵魂(金币+1):欢迎回帖交流，欢迎常来食品板块~~ 2010-10-03 20:53:38
小心点(金币+3):谢谢~ 2010-10-04 10:14:54
可以先用液体培养基富集，如果均悬液混浊后再划线接种；
乳酸菌的生存条件很宽。因为它是原核生物，结构相对简单。可以用50ml饱和脱脂奶粉溶液＋30ml 50％甘油 ＋ 20％ 对数期细菌原液 在 -85度条件下保存好几年。我做的实验中，pH到达3，乳酸菌还可以生长。不过培养乳酸菌不要培养时间过长，不然会出现自溶现象，菌液里的细菌数反而减少。细菌生长曲线分潜伏期，对数期/生长期，成熟期，衰退期，一般而言，成熟期的细菌对外界因数的抵抗力最强但乳酸菌容易自溶，成熟期很难控制，一不小心就生产过头，出现自溶。那样的话，解冻后的细菌潜伏期会加长，甚至无法生长。所以保存的时候最好取对数期的细菌，活力大一点；

具体可以参考http://bbs.foodmate.net/thread-1 ... 奈侍猓Ｍ阅阌杏�
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2楼2010-10-03 20:20:49
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小心点

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 韩俊 at 2010-10-03 20:20:49:
可以先用液体培养基富集，如果均悬液混浊后再划线接种；
乳酸菌的生存条件很宽。因为它是原核生物，结构相对简单。可以用50ml饱和脱脂奶粉溶液＋30ml 50％甘油 ＋ 20％ 对数期细菌原液 在 -85度条件下保存好几年 ...

问题是菌种往往在菌悬液中生长良好，但是在平板上就是不长，很奇怪，我也是选取对数期的菌种保存的，是不是培养基中乳酸积累过多，导致菌体死亡啊？是不是把菌离心下来保藏更好呢？谢谢~
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3楼2010-10-04 10:17:14
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jiejie521

金虫 (正式写手)
学习一下，
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很高兴来到这里,希望有所提高
4楼2011-07-13 14:20:27
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