24小时热门版块排行榜    

查看: 1596  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lihaoexe

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】重组蛋白表达 已有7人参与

最近克隆表达好几个蛋白,效果都不理想,有的不表达,有的是包涵体,很郁闷,我用的是pET28a(+)载体,据说histag对表达很有影响,是不是这个问题啊?大家有好的经验分享一下哈
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

米菲的旋律

木虫 (著名写手)

Always Keep The Faith!

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-09-15 23:38:10
引用回帖:
Originally posted by jasco at 2010-09-15 17:20:50:
his tag就6个氨基酸,对你的蛋白影响会很小的

顶2,3,5楼,没错就是这样。

蛋白能否成功表达纯化,目前世界上都没有一种万能的方法,只能靠不断尝试变换载体,宿主,buffer等条件了。(比如我实验室的某蛋白,在大肠可以表达,在酵母就不行。)
物必先腐而后虫生
7楼2010-09-15 17:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

sfxt001

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
在诱导表达的条件充分优化的前提下,如果出现这些问题,通常跟你要表达的蛋白本身的性质有关系
2楼2010-09-15 16:18:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月月大可

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):内在决定外在啊 2010-09-15 23:38:02
引用回帖:
Originally posted by lihaoexe at 2010-09-15 16:13:04:
最近克隆表达好几个蛋白,效果都不理想,有的不表达,有的是包涵体,很郁闷,我用的是pET28a(+)载体,据说histag对表达很有影响,是不是这个问题啊?大家有好的经验分享一下哈

我这一年多来构建了近四十个表达载体,得出的结论是蛋白的表达情况核心在于蛋白本身性质,与载体、诱导条件的关系相对较小。
3楼2010-09-15 16:29:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihaoexe

银虫 (小有名气)

据说带histag的包涵体做変复性也有影响,有知道的吗
4楼2010-09-15 16:40:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +19 羊腰板 2026-08-21 22/1100 2026-08-25 10:38 by popular289
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +17 kkkl_v 2026-08-19 18/900 2026-08-25 09:41 by windflowerwy
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 明天应该可查了!? +5 chengyan1220 2026-08-23 5/250 2026-08-24 23:28 by 我4大白菜
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
信息提示
请填处理意见