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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】带GST标签的重组蛋白的纯化？
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niuniu2010

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】带GST标签的重组蛋白的纯化？已有11人参与

将带GST标签的重组蛋白进行酶切，怎样分离GST标签，目的蛋白及所用的酶切酶？能否用分子筛、跑胶等方法分离且保持目的蛋白的活性？
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1楼2010-09-10 16:27:36
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zyflf

木虫 (正式写手)
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Originally posted by 月月大可 at 2010-09-14 23:17:07:
GST在溶液中一般都是二聚体形式。

一般来说我们酶切后更换至再次过GST柱，标签和酶（pre酶）都挂在柱子上，目的蛋白穿透。

离子交换柱能不能分开要看你蛋白的性质了

酶切后不是直接上柱吗，为什么要转至binding buffer中？
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7楼2010-09-16 10:29:24
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zyflf

木虫 (正式写手)
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引用回帖:
Originally posted by 月月大可 at 2010-09-16 11:56:37:


直接洗脱的蛋白中还有还原性谷胱甘肽，没法挂在柱子上。必须除掉！

我刚开始做蛋白，能不能推荐一些资料？谢谢
zhangyongfu85@gmail.com
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9楼2010-09-17 11:03:35
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