| 查看: 1256 | 回复: 9 | |||
[交流]
【求助/交流】可不可以不构建载体已有9人参与
|
| 请问大家，为什么要构建载体啊，我可不可以跑完PCR，电泳后回收直接拿去测序，为什么连到质粒上还要转到大肠杆菌里面去？ |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有126人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
根据已知序列，从相同菌种(菌株编号不同)中能PCR出目的基因吗？
已经有6人回复- pMG36e 构建的奇怪现象
已经有29人回复
- 钛硅分子筛能不能作为催化剂载体使用
已经有7人回复
- 【求助/交流】构建问题
已经有3人回复
- 【求助】takara的LA—Taq酶能不能直接用于T载体的连接...？
已经有6人回复
- 【求助/交流】质粒无测序引物可以测序么？
已经有14人回复
- 【求助/交流】生物合成基因簇的克隆方法
已经有12人回复
- 【资源】催化剂制备中浸渍（等体积浸渍）不断改进
已经有151人回复
- 【求助/交流】连接转化，帮帮忙
已经有9人回复
- 【求助/交流】物过量表达载体可否以基因组DNA进行
已经有6人回复
2楼2010-08-26 09:12:47
3楼2010-08-26 09:23:11
jukongka
铁杆木虫 (著名写手)
年度最忠心木虫
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 6807.7
- 散金: 8
- 红花: 14
- 帖子: 1439
- 在线: 201.6小时
- 虫号: 161427
- 注册: 2006-01-09
- 性别: GG
- 专业: 肿瘤生物治疗
4楼2010-08-26 11:05:29
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
支持2楼 |
5楼2010-08-26 11:06:50
6楼2010-08-26 13:12:38
silicare
荣誉版主 (文坛精英)
合伙创业版兼职版主
- MolEPI: 1
- 应助: 88 (初中生)
- 贵宾: 29.823
- 金币: 18946.3
- 散金: 24272
- 红花: 300
- 沙发: 88
- 帖子: 10222
- 在线: 1602.6小时
- 虫号: 948825
- 注册: 2010-01-26
- 专业: 摩尼教
- 管辖: 新药研发
★ ★ ★
1949stone(金币+3):好细致 2010-08-26 15:06:58
1949stone(金币+3):好细致 2010-08-26 15:06:58
|
纠正一下： PCR产物直接测序才能反应原始模板的序列情况 克隆到载体里边是为了要这段序列得以保存，并能够大量的保真性复制，以便于后期的基因组和蛋白质组学的研究 也就是说，如果克隆到载体，一定要首先知道这段序列的确切的碱基组成，把一个未知基因未经PCR产物测序就拿去克隆是不科学不可信的 因为PCR产物是一个含有少量突变的综合体，不管是用什么酶 而测序正好反应的就是全部的碱基信号，少量突变不会影响 这些突变一旦克隆到载体再测序就改变了对原始模板的认识 这就是为什么一般挑克隆去测序都要多挑几个，就是为了防止突变 |
7楼2010-08-26 13:39:32
8楼2010-08-27 08:19:27
diana0423
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1490.3
- 帖子: 74
- 在线: 19.1小时
- 虫号: 389801
- 注册: 2007-06-01
- 性别: MM
- 专业: 环境微生物学
9楼2010-08-27 20:09:59
tiani_tan
金虫 (小有名气)
- 应助: 30 (小学生)
- 金币: 1251.7
- 散金: 5
- 红花: 3
- 帖子: 266
- 在线: 139小时
- 虫号: 803661
- 注册: 2009-07-05
- 性别: GG
- 专业: 蔬菜学与瓜果学
10楼2010-08-27 21:37:17