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[交流]
【求助/交流】可不可以不构建载体已有9人参与
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| 请问大家，为什么要构建载体啊，我可不可以跑完PCR，电泳后回收直接拿去测序，为什么连到质粒上还要转到大肠杆菌里面去？ |
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silicare
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1949stone(金币+3):好细致 2010-08-26 15:06:58
1949stone(金币+3):好细致 2010-08-26 15:06:58
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纠正一下： PCR产物直接测序才能反应原始模板的序列情况 克隆到载体里边是为了要这段序列得以保存，并能够大量的保真性复制，以便于后期的基因组和蛋白质组学的研究 也就是说，如果克隆到载体，一定要首先知道这段序列的确切的碱基组成，把一个未知基因未经PCR产物测序就拿去克隆是不科学不可信的 因为PCR产物是一个含有少量突变的综合体，不管是用什么酶 而测序正好反应的就是全部的碱基信号，少量突变不会影响 这些突变一旦克隆到载体再测序就改变了对原始模板的认识 这就是为什么一般挑克隆去测序都要多挑几个，就是为了防止突变 |
7楼2010-08-26 13:39:32
2楼2010-08-26 09:12:47
3楼2010-08-26 09:23:11
jukongka
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4楼2010-08-26 11:05:29