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Silencess

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】基因组酶切··和DNA 定量分析~谢谢! 已有3人参与

貌似一般酶切都用新提取的DNA `` 我想问下,用之前的DNA 做酶切会有很大的影响么? 或者 ,-20℃保存条件下,DNA 在多久的期限内酶切效果会比较好呢?

还有就是 我想做一个DNA片段的定量·· 是不是 荧光定量PCR是比较好的选择?
如果是,要注意些什么呢?
  

        求高人指教,不甚感激!
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繁花似錦,年華散盡。
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Silencess

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-08-26 13:31:30:
荧光定量也可以

那请问    如果做荧光定量的话 有什么要注意的么··?

看到的大部分帖子和文章都是反转录的·· 很少有DNA 水平的。。
繁花似錦,年華散盡。
7楼2010-08-27 09:06:01
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banhf

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
silicare(金币+1):谢谢交流 2010-08-25 17:59:44
你的DNA可以先跑个脉冲看一下是否降解,再进行试验。
DNA保存时间过长可能会降解而影响酶切结果,如果需要长期保存,最好使其沉淀在70%乙醇中,用时吹干溶解即可。
你的定量如果没有特殊要求的话就用普通的琼脂糖电泳就可以了,DNA样品点一个梯度,Marker点一个梯度就能估出浓度了。
2楼2010-08-25 14:41:54
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Silencess

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by banhf at 2010-08-25 14:41:54:
你的DNA可以先跑个脉冲看一下是否降解,再进行试验。
DNA保存时间过长可能会降解而影响酶切结果,如果需要长期保存,最好使其沉淀在70%乙醇中,用时吹干溶解即可。
你的定量如果没有特殊要求的话就用普通的琼脂 ...

呵呵· 谢谢哦~   这个DNA 的片段很小呢·· 我想测其在基因组中的拷贝数~
繁花似錦,年華散盡。
3楼2010-08-26 09:09:27
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banhf

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你要测拷贝数的话可以做下southern blot
4楼2010-08-26 13:02:28
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