24小时热门版块排行榜    

查看: 6399  |  回复: 8

zj408694018

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请教一下大家的酶切时间是多久 已有8人参与

各位,请教一下大家的双酶切的酶切时间是多久,还有就是连接时候载体和片段加多少啊,我最近连接很不顺利,挑菌落后做PCR能做出来,然后再双酶切却又没有目的带
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gagalady

新虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励 2010-08-04 14:22:23
恩  酶切时间不一定呀   2h  4h  时间更长有的是
你可以进宝生物的网站  去下载你所用酶的说明书看看
2楼2010-08-04 12:50:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dcb005

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酶切3h
★穷则独善其身,达则兼济天下★
3楼2010-08-04 13:32:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bunny0512

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励 2010-08-04 14:22:39
37℃ 双酶切4h 或过夜     具体要参照产品手册
在哪里~在哪里见过你~
4楼2010-08-04 14:01:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cheo163

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我用1.5h切过质粒,4h切过载体,6-8h切过pcr产物
5楼2010-08-04 14:51:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月月大可

木虫 (著名写手)

一般的鉴定2-4h,如果想确定充分一些也过夜切过。
6楼2010-08-04 18:13:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangyu238

铜虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1):good! 2010-08-04 20:42:17
看体系吧,我一般10微升37℃切2小时,DNA和质粒均可切开,
100微升体系切3小时。
7楼2010-08-04 20:25:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cpu2004

金虫 (小有名气)

看酶和体系,一般我会用低于最适温度2到3度酶切过夜,其中加的酶量也是推荐的1/2,
8楼2010-08-04 23:18:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

谁伴我闯荡

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果效率高的话最适温度酶切三小时足够了,过夜可能出现非特异性位点的切割。如果效率低一点的话,可以延长时间,比如没有共用Buffer等问题。我一般都是50微升体系切的,按照推荐的20微升也可以,3小时切出来电泳都很干净的
此生愿为扑火蛾,纵是焚化亦无悔
9楼2010-08-05 07:34:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zj408694018 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 12/600 2026-08-30 17:11 by hZiFeudZyoGR
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 14:05 by GkCVyODlx4mR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 14:03 by GkCVyODlx4mR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:02 by l0VvVHGBGRLv
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 11:10 by l0VvVHGBGRLv
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:39 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 07:05 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:34 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +4 349506619 2026-08-28 4/200 2026-08-29 22:41 by alongwaytogo
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
信息提示
请填处理意见