应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR产物切胶回收后可不可以加A尾,做TA克隆，急！希望高手们能帮帮忙！
101/1返回列表
查看: 3941  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Illfxy

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR产物切胶回收后可不可以加A尾,做TA克隆，急！希望高手们能帮帮忙！ 已有9人参与

小弟刚开始做分子，在做TA克隆，可是PCR出来有杂带，不能直接做连接，想做一个切胶回收，但是又担心回收的DNA脱掉了A尾巴，想问一下有没有可以回收后加尾的方法？万分感谢解答的高手！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

科研

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
探索人类未来的其中一人
1楼 2010-08-02 23:33:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangao

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-08-03 05:52:12
a是加到了PCR产物末端  怎么会丢掉呢？TA克隆取决于你PCR用的酶，比如Taq可以加A, Pfu不能加A
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-08-03 00:10:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
多虑了不会的，降解没那么快的
赞一下(1人) 回复此楼
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-08-03 00:15:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoru2010

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
A是在你需要的带里，跟杂带有啥关系，回收是必须的
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-08-03 08:17:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-08-03 09:19:53
可以回收

不放心可以加A尾
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-08-03 08:18:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liouwzh

木虫 (正式写手)
割胶回收一般不会是PCR产物脱掉A尾的，如果不放心可以用taq酶加入dNTP，72度再延伸10min。
赞一下 回复此楼
6楼2010-08-03 09:32:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
放心，你刀法没那么精准，一刀切掉A尾巴还是很有难度的。
PS：你咋不担心会将片段切两半呢？
开玩笑的。
赞一下(1人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
7楼2010-08-03 16:28:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天空2011

铜虫 (小有名气)
考虑的太多了
回复此楼
8楼2013-03-05 09:32:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beer胖

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
A不会丢的，直接胶回收做克隆就行。
赞一下 回复此楼
9楼2013-03-07 21:49:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风尤溪渐

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by liouwzh at 2010-08-03 09:32:25
割胶回收一般不会是PCR产物脱掉A尾的，如果不放心可以用taq酶加入dNTP，72度再延伸10min。

在胶回收产物里加taq、dntp重新加A尾后 要纯化一下吗  还是就直接连接
赞一下 回复此楼
10楼2015-12-21 11:42:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Illfxy 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 282求调剂 +3 wcq131415 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:16 by userper
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +17 陌の森林 2026-03-18 17/850 2026-03-25 11:26 by greychen00
[考研] 295求调剂 +6 一志愿京区211 2026-03-18 8/400 2026-03-25 10:28 by userper
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 08工学调剂 +12 用户573181 2026-03-20 17/850 2026-03-24 21:45 by 番茄炖了西红柿
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料，材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 327求调剂 +5 prayer13 2026-03-23 5/250 2026-03-23 22:11 by 星空星月
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +6 ￣^￣゜汗 2026-03-19 9/450 2026-03-23 19:53 by pswait
[考研] 316求调剂 +7 梁茜雯 2026-03-19 7/350 2026-03-23 16:21 by lingjue
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 材料与化工（0856）304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭