| 查看: 1849 | 回复: 7 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】关于硫酸铵沉淀的问题 已有7人参与
|
|||
| 我在做酶纯化，先把发酵液硫酸铵分级沉淀，结果每一级都有活性，也有蛋白，比活都差不多，一点都没分开。于是我又把分级的沉淀合并过超滤膜，先过的十万的膜，结果蛋白都在十万以上，十万以下几乎什么都没有。我觉得这个结果有问题，怎么可能两种方法都一点效果都没有。而且发酵液里怎么会没有十万以下的蛋白呢？这到底是为什么呢？亲们，谁能告诉我呀，或者有谁有过同样的情况啊！ |
回复此楼» 猜你喜欢
311（085601）求调剂
已经有4人回复
-
305求调剂
已经有4人回复
-
一志愿北化085600材料专硕275|有文章专利｜求调剂
已经有7人回复
-
一志愿华理，数一英一285求A区调剂
已经有12人回复
-
289求调剂
已经有11人回复
-
食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂
已经有7人回复
-
生物学学硕，一志愿湖南大学，初试成绩338
已经有6人回复
-
321求调剂
已经有7人回复
-
343求调剂
已经有4人回复
-
本科新能源科学与工程，一志愿华理能动285求调剂
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 硫酸铵沉淀脂肪酶的问题
已经有5人回复
- 求助硫酸铵沉淀蛋白质的问题
已经有12人回复
- 硫酸铵沉淀蛋白质
已经有16人回复
- 硫酸铵沉淀后透析，里面的沉淀是什么？
已经有6人回复
- 关于蛋白纯化的问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】急求关于硫酸铵沉淀
已经有3人回复
- 【求助/交流】又硫酸铵沉淀问题
已经有4人回复
- 【求助/交流】硫酸铵沉淀蛋白
已经有12人回复
- 【求助/交流】请问哪位懂硫铵沉淀，给点经验！
已经有6人回复
- 【求助/交流】蛋白质盐析及除盐
已经有14人回复
- 【求助/交流】硫酸铵沉淀蛋白
已经有6人回复
- 【求助/交流】硫酸铵分级沉淀
已经有13人回复
刘小乐
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 53.3
- 散金: 11
- 帖子: 67
- 在线: 10.8小时
- 虫号: 943403
- 注册: 2010-01-16
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
4楼2010-07-12 12:53:39
2楼2010-07-06 10:25:32
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):很详细，感谢交流~~ 2010-07-09 17:06:32
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):很详细，感谢交流~~ 2010-07-09 17:06:32
|
先说硫酸铵沉淀 你可以先做个小试：将样品分成五等分，每等份分别加入20%、30%40%、50%、60%的硫酸铵。取上清去沉淀，然后再分别往上清中加入硫酸铵至：30%、40%、50%、60%、70%。取沉淀再溶解测活性。这样就能大致清楚你所需要蛋白的沉淀浓度了。 关于超滤也有很多实际问题。超滤膜给出的分子量数值只是一个大致的范围，它不可能分的很准确，一般要选择比目标蛋白大2-3倍左右的膜来分离。比如你所需要分离的蛋白分子量有5万，那么你就要选择10万-15万的膜。 楼主所说的将分级沉淀合并过10万膜，很有可能过下去的分子量都在5万以下，甚至更低，结合你自己的实验条件，你的发酵液里小分子量蛋白可能比较少。 |
3楼2010-07-09 16:06:38
5楼2010-07-12 15:29:20
