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quinn

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于硫酸铵沉淀的问题 已有7人参与

我在做酶纯化,先把发酵液硫酸铵分级沉淀,结果每一级都有活性,也有蛋白,比活都差不多,一点都没分开。于是我又把分级的沉淀合并过超滤膜,先过的十万的膜,结果蛋白都在十万以上,十万以下几乎什么都没有。我觉得这个结果有问题,怎么可能两种方法都一点效果都没有。而且发酵液里怎么会没有十万以下的蛋白呢?这到底是为什么呢?亲们,谁能告诉我呀,或者有谁有过同样的情况啊!
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古之成大事者,不惟有超士之才,亦有坚忍不拔之志
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jqq1985

银虫 (正式写手)

10万也就是100Kd,有些蛋白都是几聚体,分子量很容易就超过100kd。另外,不是所有的蛋白都可以用硫酸铵进行梯度沉淀的。建议跑胶看看发酵液中的蛋白质成分,另外采取其他的纯化方式。
5楼2010-07-12 15:29:20
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