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evebobo

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】DGGE 胶回收后做PCR没有条带是怎么回事??急!!! 已有17人参与

我的DGGE胶回收后没有条带 能问下有什么问题吗?
胶回收用了两种方法都不行  不知道为什么  大家遇到过这种情况吗?
以前条带没分开的时候回收做PCR有条带 现在分开了却没了   期间换酶了
能是酶的问题吗? 是新的阿  我很疑惑 很郁闷  
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果做得不好,你这样试一下。
你把条带切下来,泡在去离子水(胶捣碎,水没过就好)放置一夜,不要离心,直接以这个为模板进行扩增,应该没问题的。
我这边一只在用这个方法,所以祝你好运了。

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好好做事,踏实做人!
28楼2010-07-27 07:46:40
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

引用回帖:
Originally posted by 良缘百合 at 2011-05-25 20:32:13:
你好,我想请教一下,切胶后放置一夜,是室温放置?还是4摄氏度呢?
谢谢!期待回复!

冰箱四度过夜
好好做事,踏实做人!
31楼2011-05-27 07:33:40
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
dhd997(金币+5, EPI+1): 一并奖励哦 2011-05-30 12:48:49
引用回帖:
Originally posted by 良缘百合 at 2011-05-27 23:30:18:
好的,太感谢了!
现在有个现象,不太明白:我昨天切胶后,用枪头捣碎,加入无菌水至没过胶,放4℃过夜。今天发现胶没溶,是放置时间不够长吗?还是要水浴下促进胶溶呢?你处理样品时有这种现象么?

胶在4度不可能溶解,但是DNA会释放出来。
所以,吸取液体就够用了,不要管胶
好好做事,踏实做人!
33楼2011-05-28 15:34:02
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