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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】蛋白沉淀或者浓缩的方法
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honglanbai

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】蛋白沉淀或者浓缩的方法 已有6人参与

我的蛋白是糖蛋白，在培养细胞的培养基中，我做考马斯亮蓝染色但是蛋白浓度太低了，有谁知道我如何才能将蛋白浓缩，使我在制样的时候浓度会高些，我用过丙酮沉淀，但是再溶解很困难，谢谢大家啊
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1楼 2010-06-03 14:06:17
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ben1147

木虫 (正式写手)
★
honglanbai(金币+5):谢谢参与
冻干试过么？
先把样品冻了，然后真空抽干？
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2楼2010-06-03 14:11:22
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honglanbai

木虫 (正式写手)
我们没有冻干的条件
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3楼2010-06-03 14:33:41
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ben1147

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
那就盐析吧，不过摸条件估计挺麻烦
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-06-03 14:44:10
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honglanbai

木虫 (正式写手)
有谁具体做过吗
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5楼2010-06-03 15:14:41
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-06-03 19:04:19
最简单是用离心式的蛋白浓缩管
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6楼2010-06-03 15:34:38
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jingcp200320

银虫 (小有名气)
★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-06-03 19:04:01
第一种方法是超滤，使用超滤管就可以了。
第二种方法你可以透析，使用40%蔗糖浓缩，一般5mL体积浓缩2h就会达到1mL左右。  切记，40%蔗糖要溶解在你的蛋白缓冲液中，
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7楼2010-06-03 16:21:43
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85715623

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
建议减压旋蒸，可以低温下操作。
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8楼2010-06-03 16:25:37
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honglanbai

木虫 (正式写手)
我是想浓缩下用来跑电泳，就是做个考染或者银染，但是我们现在的量比较低，看不清楚，用丙酮沉淀会高点，但是有限。

[ Last edited by honglanbai on 2010-6-8 at 10:12 ]
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9楼2010-06-08 10:11:00
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)
超低温抽真空。这个对蛋白的破坏不大，还比较简单。
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10楼2010-06-08 10:54:02
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