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【求助/交流】质粒提的量不多
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tdong06
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[交流]
【求助/交流】质粒提的量不多
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我最近做了个枯草芽孢杆菌的gfp质粒的电转化,质粒电转化进去之后再从枯草芽孢杆菌里抽提质粒,抽提的量就显得很少,带很淡。与大肠中的质粒相比就差多了,不知道是什么原因?
大家帮忙分析下。。。
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1楼
2010-05-28 17:40:23
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gastrodia
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reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-05-29 05:25:02
你以为其他的菌里面质粒的拷贝数都像大肠杆菌一样
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6楼
2010-05-28 23:17:17
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snzydong
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scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-28 22:50:47
这很正常吧,枯草芽孢杆菌不像大肠杆菌那么容易培养吧,所以可能提出来的质粒的量就不高。
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2楼
2010-05-28 18:44:26
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桂花啊
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scelab(金币+1):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-05-28 22:50:57
质粒电转化的效率高吗?做检测了吗?
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3楼
2010-05-28 19:53:05
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tdong06
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Originally posted by
桂花啊
at 2010-05-28 19:53:05:
质粒电转化的效率高吗?做检测了吗?
这个与转化效率的关系应该不是很大吧?我是挑选有绿色荧光的转化子加抗生素摇的,摇了24h后那个OD达到2.0的样子,用质粒试剂盒提取质粒,平常的大肠杆菌之类都是很容易抽提得到很亮的条带,但是这个枯草芽孢杆菌是不行的。所以这个不知道是怎么回事,是不是枯草芽孢的细胞壁比较厚呢?
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4楼
2010-05-28 20:47:43
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