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【求助/交流】如何提高DNA片段转化率
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dhmdddd
木虫
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专业: 微生物遗传育种学
[交流]
【求助/交流】如何提高DNA片段转化率
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感受态细胞没有问题,转化质粒很容易就能转化成功,DNA片段在转化时加到10微升还是没有转化成功,各位大侠,有什么方法可以提高转化率的吗?先谢过了!!
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1楼
2010-05-20 09:14:40
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小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
片段用化转效率太低了,建议用电转。
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9楼
2010-05-20 21:26:37
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boystrong
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专业: 有机分子功能材料化学
★
dhmdddd(金币+1): 2010-05-20 12:11:58
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-20 12:37:44
呵呵,提高人品。
转化的目的也是让菌的先冷冻后受热,通过膜表面进入。我一般,感受态细胞先放置在冰上,然后加入转化质粒,混匀插入冰上5分钟,再放入热水(30℃)2分钟,再冷冻5分钟,即可放置摇床上。
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梦想追风
2楼
2010-05-20 12:10:34
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我转化的是DNA片段,质粒转化也是很成功的啊,还有,我们用的都是42℃热激,这个,不太一样的……
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上班族,学习ing……
3楼
2010-05-20 12:14:02
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42℃有人这么用,我不喜欢。太烫了,会杀死菌的。你的至多30秒就得拿出来了。
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梦想追风
4楼
2010-05-20 12:20:20
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