24小时热门版块排行榜    

查看: 1151  |  回复: 10

dhmdddd

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】如何提高DNA片段转化率 已有5人参与

感受态细胞没有问题,转化质粒很容易就能转化成功,DNA片段在转化时加到10微升还是没有转化成功,各位大侠,有什么方法可以提高转化率的吗?先谢过了!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

上班族,学习ing……
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

boystrong

银虫 (正式写手)


dhmdddd(金币+1): 2010-05-20 12:11:58
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-20 12:37:44
呵呵,提高人品。
转化的目的也是让菌的先冷冻后受热,通过膜表面进入。我一般,感受态细胞先放置在冰上,然后加入转化质粒,混匀插入冰上5分钟,再放入热水(30℃)2分钟,再冷冻5分钟,即可放置摇床上。
梦想追风
2楼2010-05-20 12:10:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhmdddd

木虫 (正式写手)

我转化的是DNA片段,质粒转化也是很成功的啊,还有,我们用的都是42℃热激,这个,不太一样的……
上班族,学习ing……
3楼2010-05-20 12:14:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

boystrong

银虫 (正式写手)

42℃有人这么用,我不喜欢。太烫了,会杀死菌的。你的至多30秒就得拿出来了。
梦想追风
4楼2010-05-20 12:20:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wordsworth3180

木虫 (正式写手)

dhmdddd(金币+1): 2010-05-20 13:24:03
42度很常用啊,90sec没啥问题
5楼2010-05-20 13:12:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhmdddd

木虫 (正式写手)

是啊,大肠杆菌,42℃,90s,,转化子长的还很好的啊,但是杯具的是转化DNA片段就是什么都不长,所以才请教有没有什么方法可以提高转化率的……
上班族,学习ing……
6楼2010-05-20 13:23:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

boystrong

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
要不你加点甘油和氯化钙。具体的你查查
梦想追风
7楼2010-05-20 13:42:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhmdddd

木虫 (正式写手)

制备感受态细胞的时候不是已经加进去氯化钙和甘油了吗?谢谢,我再查查看了!!
上班族,学习ing……
8楼2010-05-20 13:43:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zlmking

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
片段用化转效率太低了,建议用电转。
9楼2010-05-20 21:26:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixg

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
既然是转质粒挺好,说明感受态细胞可以,那就应该考虑是连接效率的问题。
10楼2010-05-21 08:15:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dhmdddd 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学调剂0703 +8 啊我我的 2026-03-11 8/400 2026-03-16 17:23 by 我的船我的海
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 309求调剂 +5 花与叶@ 2026-03-10 5/250 2026-03-16 14:13 by 哦哦123
[考研] 东南大学364求调剂 +4 JasonYuiui 2026-03-15 4/200 2026-03-16 08:36 by Linda Hu
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-15 6/300 2026-03-16 08:00 by wang_dand
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +6 zlingli 2026-03-13 6/300 2026-03-15 20:00 by ryzcf
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 328,0703考生求调剂,一志愿为东北师范大学 +4 观素律 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:24 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 301求调剂 +6 Liyouyumairs 2026-03-11 6/300 2026-03-13 20:11 by JourneyLucky
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 求调剂 资源与环境 285 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:31 by houyaoxu
[考研] 085600 材料与化工 295 求调剂 +10 dream…… 2026-03-10 12/600 2026-03-12 13:46 by dream……
信息提示
请填处理意见