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melodyxin

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】如何对霉菌破胞测定其胞内酶活?急! 已有5人参与

请问,如何对木霉菌破胞,测定它胞内的蛋白酶活力?
我的实验不要求分离出该蛋白,只需像细菌一样,破胞后将胞内物质悬浮于某个溶液中,测定活力即可。
只是不知道该怎么破胞,很急,麻烦各位帮帮忙!
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

有人可以帮忙吗?
2楼2010-05-17 13:31:55
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mhx102006

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-17 17:07:03
试试超声
3楼2010-05-17 14:03:30
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houlaide

新虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-17 17:07:11
液氮研磨
4楼2010-05-17 16:33:23
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by houlaide at 2010-05-17 16:33:23:
液氮研磨

研磨会不会把酶蛋白破坏掉?
5楼2010-05-17 17:03:59
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by mhx102006 at 2010-05-17 14:03:30:
试试超声

嗯,正打算尝试。
6楼2010-05-17 17:04:17
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

我在考虑用蜗牛酶酶解后,液氮冻融破胞。
7楼2010-05-17 17:04:44
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ottolzm

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):good idea!:tiger37: 2010-05-17 20:53:19
反复冻融 然后低功率超声破壁 即可 我们实验室有人用此方法做过白地霉 青霉菌 效果挺好的
8楼2010-05-17 20:49:28
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by ottolzm at 2010-05-17 20:49:28:
反复冻融 然后低功率超声破壁 即可 我们实验室有人用此方法做过白地霉 青霉菌 效果挺好的

好的,谢谢。我试试看。
9楼2010-05-26 08:25:56
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zhmy26

金虫 (正式写手)

反复冻融破壁的效果不是很好,尤其是对酵母细胞。我还是建议低温超声地方法。
10楼2010-05-26 15:47:19
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