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402567346

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】ssr 已有7人参与

PCR后进行DNA电泳跑的条带是两条的原因,我要的是一条,请各位大侠指教,谢谢
http://
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呵呵呵
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

引物特异性不好,提高退火温度试试
2楼2010-05-16 13:50:28
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小白兄

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引物特异性不好是一方面,你跑电泳电压多少啊,怎么都扭曲了。
时光如流水,匆匆而过。
3楼2010-05-16 20:04:16
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402567346

铁虫 (初入文坛)

ss r

我的退火温度是50度,跑电泳的电压是80v,40M.
呵呵呵
4楼2010-05-16 22:20:37
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天空与飞鸟

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
很有可能就是你之前提的DNA或蛋白质不纯   所以出现的不是一条带
5楼2010-05-16 22:30:44
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402567346

铁虫 (初入文坛)

ssr

我的DNA检测过了,还不错,是不是我的引物不行,要不我还一个引物
呵呵呵
6楼2010-05-16 22:43:35
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liweiwei0812

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):鼓励新虫交流~~ 2010-08-25 12:33:59
引物特异性不好,可以提高退火温度试试看,不行还是重新设计引物吧。
7楼2010-08-25 11:31:10
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
貌似你的染料有问题,用的什么,goldview??
8楼2010-08-25 12:18:53
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怎么都行

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的图上没有Marker,不知道你的条带是多长,前面的是不是引物二聚体?但是看形状不太像。
条带跑歪了有可能是缓冲液用久了,缓冲能力降低了。也有可能你的PCR的Buffer和你电泳的Buffer不搭配(我在做DGGE电泳的时候曾碰见过)。
再者,简单序列重复ssr微卫星标记的PCR产物不是应该是多条吗!不同个体扩增出的带的差异就是tag.
9楼2010-08-25 12:44:35
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