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402567346

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】ssr 已有7人参与

PCR后进行DNA电泳跑的条带是两条的原因,我要的是一条，请各位大侠指教，谢谢
http://
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呵呵呵
1楼 2010-05-16 12:42:13
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)
引物特异性不好，提高退火温度试试
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2楼2010-05-16 13:50:28
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小白兄

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引物特异性不好是一方面，你跑电泳电压多少啊，怎么都扭曲了。
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时光如流水，匆匆而过。
3楼2010-05-16 20:04:16
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402567346

铁虫 (初入文坛)

ss r

我的退火温度是50度，跑电泳的电压是80v，40M.
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呵呵呵
4楼2010-05-16 22:20:37
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天空与飞鸟

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
很有可能就是你之前提的DNA或蛋白质不纯   所以出现的不是一条带
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5楼2010-05-16 22:30:44
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402567346

铁虫 (初入文坛)

ssr

我的DNA检测过了，还不错，是不是我的引物不行，要不我还一个引物
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呵呵呵
6楼2010-05-16 22:43:35
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liweiwei0812

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
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lstt09nk(金币+2):鼓励新虫交流~~ 2010-08-25 12:33:59
引物特异性不好，可以提高退火温度试试看，不行还是重新设计引物吧。
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7楼2010-08-25 11:31:10
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silicare

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★
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貌似你的染料有问题，用的什么，goldview？？
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8楼2010-08-25 12:18:53
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怎么都行

银虫 (小有名气)
★
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你的图上没有Marker，不知道你的条带是多长，前面的是不是引物二聚体？但是看形状不太像。
条带跑歪了有可能是缓冲液用久了，缓冲能力降低了。也有可能你的PCR的Buffer和你电泳的Buffer不搭配（我在做DGGE电泳的时候曾碰见过）。
再者，简单序列重复ssr微卫星标记的PCR产物不是应该是多条吗！不同个体扩增出的带的差异就是tag.
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9楼2010-08-25 12:44:35
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