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森林有木

银虫 (初入文坛)

[求助] 关于ssr开发问题

刚做微卫星的开发，我用的是磁珠富集法，磁珠富集后的产物pcr30个循环，结果发现条带不是很亮，不知道哪位大侠做过这发面的，有没有遇到过这种情况，感觉是前面洗脱次数太多了还是没杂交好还是别的什么原因，想请教一下各位大侠，在下感激不尽

右边的三个是富集后的pcr电泳图
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笑笑别人 笑笑自己
1楼 2012-02-09 13:39:55
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森林有木

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by liugs at 2012-02-10 10:02:20:
亮度不能说明问题，我做的是富集之后扩增5-10个循环，亮度也不高，但是富集效率挺高的！

哦，亮度不高的话就不能做纯化了，直接连接可以吗？
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7楼2012-02-10 13:00:37
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森林有木

银虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
楼: Originally posted by liugs at 2012-02-10 18:02:27:
应该纯化的，这个不要节省！

ok，发你一个站内信liugs 帮我看看有什么问题吧
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13楼2012-02-10 19:01:36
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liugs

禁虫 (正式写手)
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2楼2012-02-09 17:29:53
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liugs

禁虫 (正式写手)
★
西瓜(金币+1): 鼓励热心交流 2012-02-09 22:18:57
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3楼2012-02-09 17:30:32
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森林有木

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by liugs at 2012-02-09 17:29:53:
可以直接做连接克隆！

嗯 可是就是觉得淡了点 他们做的可亮了 不解 一样的方法
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4楼2012-02-09 17:43:15
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森林有木

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by liugs at 2012-02-09 17:30:32:
但是，不确定是否富集到需要的片段！

里面应该有重复序列的片段 只是不知道有多少额
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5楼2012-02-09 17:45:03
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liugs

禁虫 (正式写手)
森林有木(金币+2): ★★★很有帮助 2012-02-10 13:01:27
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6楼2012-02-10 10:02:20
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firsky

金虫 (小有名气)
对照marker的亮度，这个应该可以吧
纯化不能省，杂质会影响酶活性
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8楼2012-02-10 14:07:08
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森林有木

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by firsky at 2012-02-10 14:07:08:
对照marker的亮度，这个应该可以吧
纯化不能省，杂质会影响酶活性

就怕浓度不高纯化后就没了，上次我没纯化的菌长得好好地，纯化的反而不长菌，郁闷呐
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9楼2012-02-10 14:59:12
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liugs

禁虫 (正式写手)
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森林有木
10楼2012-02-10 18:02:27
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