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关于ssr开发问题
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关于ssr开发问题
刚做微卫星的开发,我用的是磁珠富集法,磁珠富集后的产物pcr30个循环,结果发现条带不是很亮,不知道哪位大侠做过这发面的,有没有遇到过这种情况,感觉是前面洗脱次数太多了还是没杂交好还是别的什么原因,想请教一下各位大侠,在下感激不尽
右边的三个是富集后的pcr电泳图
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2012-02-09 13:39:55
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Originally posted by
liugs
at 2012-02-10 10:02:20:
亮度不能说明问题,我做的是富集之后扩增5-10个循环,亮度也不高,但是富集效率挺高的!
哦,亮度不高的话就不能做纯化了,直接连接可以吗?
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7楼
2012-02-10 13:00:37
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liugs
at 2012-02-10 18:02:27:
应该纯化的,这个不要节省!
ok,发你一个站内信liugs 帮我看看有什么问题吧
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13楼
2012-02-10 19:01:36
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liugs
at 2012-02-09 17:29:53:
可以直接做连接克隆!
嗯 可是就是觉得淡了点 他们做的可亮了 不解 一样的方法
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2012-02-09 17:43:15
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liugs
at 2012-02-09 17:30:32:
但是,不确定是否富集到需要的片段!
里面应该有重复序列的片段 只是不知道有多少额
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2012-02-09 17:45:03
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对照marker的亮度,这个应该可以吧
纯化不能省,杂质会影响酶活性
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2012-02-10 14:07:08
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firsky
at 2012-02-10 14:07:08:
对照marker的亮度,这个应该可以吧
纯化不能省,杂质会影响酶活性
就怕浓度不高纯化后就没了,上次我没纯化的菌长得好好地,纯化的反而不长菌,郁闷呐
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9楼
2012-02-10 14:59:12
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2012-02-10 18:02:27
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